HTRF CAMP GI KIT - 1K PTS 环腺苷酸Gi 测量试剂盒 -1,000测试

检测原理

cAMP 试剂盒基于竞争性形式，涉及用 d2（受体）标记的特异性抗体和与 cryptate 偶联的 cAMP（供体）。这使得能够直接表征作用于贴壁或悬浮细胞中 Gi 偶联受体的所有类型的化合物。细胞产生的天然 cAMP 与隐窝标记的 cAMP 竞争与单克隆抗 cAMP 结合。

检测方案

该方案简单明了，只需两个孵育步骤： - 目标化合物刺激细胞 - 使用 HTRF 试剂进行 cAMP 检测

激动剂剂量反应验证

用参考激动剂 SNC-162 处理以 6000 个细胞/孔稳定表达 δ 阿片受体 （DOR） 的 CHO 细胞 45 分钟。

SNC-162 的表征良好，显示出与文献良好相关性的正确效力。

拮抗剂剂量反应验证

以 6000 个细胞/孔稳定表达 δ 阿片受体 （DOR） 的 CHO 细胞用 SNC-162 激动剂以 EC90 值 （10 nM） 处理 45 分钟，这是用于拮抗剂模式实验的最佳浓度。

拟合纳曲哚和纳洛酮拮抗剂的连续稀释液能够计算化合物（效力）的 IC50，这与文献完全相关。