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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF HUMAN FC KIT - 500 PTS 人免疫球蛋白检测试剂盒(竞争法)-500测试

概述


药物发现和生物工艺通常需要精确的定量技术来提升工作流程效率。当前诸如 ELISA 等方法因需要多次样本处理和复杂流程,难以满足此类需求。人 Fc 试剂盒可快速定量人 IgG 及任何含人 Fc 区域的蛋白质,适用于天然 IgG 和重组抗体。


工作原理

检测原理

人 Fc 试剂盒是一种竞争性免疫检测方法,用于测量多种生物样本中的人 IgG 或任何 hFc 标签蛋白。该检测使用 Eu³⁺- 隐花青共轭的人 Fc 特异性抗体和 d2 偶联的人 IgG,样本中的 hFc 与 d2 标记的人 IgG 竞争结合抗人 Fc Eu 隐花青。


检测流程

人 Fc 检测采用简化流程,在加入样本和人 Fc 检测试剂后仅需 1 步孵育。该流程需在室温下孵育 2.5 小时。


检测详情

关键特性

  • 检测限:9 ng/mL
  • 动态范围:5.5–4,000 ng/mL
  • 孵育时间:2.5 小时至过夜
  • EC₅₀:216–296 ng/mL


检测验证

完整 hIgG 与 Fc 片段检测

HTRF 人 Fc 检测可检测人 Fc 嵌合抗体及含人 Fc 区域的蛋白质。如图 1 所示,亲和力取决于每种 Fc 嵌合体的性质,完整 IgG 的亲和力最高。这意味着可使用人 IgG 校准品进行相对浓度评估;若校准品与被测蛋白一致,则可接近绝对浓度测定。


图 1:按标准检测流程,使用总人 IgG 检测法测试四种不同人 Fc 嵌合体的多种浓度。


基质兼容性

图 2 显示 HTRF 人 Fc 检测与不同基质的兼容性,即使存在 10% FCS 也不受影响。与其他涉及链霉亲和素 - 生物素检测的免疫分析不同,该检测对培养基不敏感,其淬灭效应可通过我们专利的 665/620 比率补偿。


图 2:使用磷酸盐缓冲液、培养基及含 10% FCS±4.4% PSGHT(青霉素、链霉素、谷氨酰胺、次黄嘌呤、胸苷)的 RPMI 中的 IgG 绘制标准曲线。


规格


其他规格

  • 应用:蛋白质定量
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF
  • 产品类别:试剂盒
  • 样本体积:10 µL
  • 运输条件:常温运输
  • 靶标类别:生物制品
  • 靶标物种:人类
  • 技术:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
  • 治疗领域:心血管疾病、感染性疾病、代谢 / 糖尿病、NASH / 肝纤维化、神经科学、罕见病
  • 单位规格:500 检测点


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货号:62HFCPEG
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