Granzyme B(也称为组织蛋白酶 G 样 1、细胞毒性 T 淋巴细胞蛋白酶 2、Fragmentin-2、Granzyme-2 或人类淋巴细胞蛋白)存在于细胞毒性淋巴细胞、NK(自然杀伤)细胞和细胞毒性 T 细胞中。它与穿孔素一起分泌,穿孔素在细胞膜上形成孔道,Granzyme B 进入靶细胞的细胞质并通过激活胱天蛋白酶触发凋亡。
本试剂盒旨在快速检测细胞上清液和全细胞中的人类 Granzyme B。该检测方法无需任何洗涤步骤即可实现高通量检测,因此与 ELISA 相比节省了时间。
人类 Granzyme B 检测采用双抗体夹心免疫分析法,涉及两种特异性抗人类 Granzyme B 抗体,分别标记有铕穴状化合物(供体)和 d2(受体)。信号强度与样品中存在的 Granzyme B 浓度成正比。
检测方案使用 384 孔小体积白板或 Revvity 小体积 96 孔板(最终体积 20 µL),右侧对其进行了描述。将 16 µL 细胞上清液、样品或标准品直接分配到板中,通过 HTRF 试剂进行检测。标记有 HTRF 供体和受体的抗体可以预先混合,并在单个分配步骤中加入,以进一步简化检测程序。通过简单地按比例调整每个添加体积,该检测可在 96 孔至 384 孔板中进行。
- 样品量:16 µL
- 最终检测体积:20 µL
- 试剂盒组件:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液和方案
- 检测限和定量限(在稀释剂中):1.8 ng/mL 和 3.7 ng/mL
- 范围:3.7 – 1,500 ng/mL
- 出结果时间:室温下过夜
- Granzyme B 标准曲线:按照试剂盒包装说明书中的程序,将试剂盒中提供的重组 Granzyme B(标准品)在 5 号稀释剂中进行系列稀释。将表示为 delta 比率的 HTRF 信号作为 Granzyme B 浓度的函数作图。
- 精密度
样品 | Granzyme B 平均浓度(pg/mL) | CV |
---|
1 | 644 | 14% |
2 | 438 | 14% |
3 | 23 | 18% |
| 平均 CV | 15% |
每个样品测量 24 次,并计算每个样品的 % CV。
样品 | Granzyme B 浓度(pg/mL) | 平均值(deltaRatio) | CV |
---|
1 | 10 | 576 | 9% |
2 | 54 | 2759 | 6% |
3 | 652 | 18940 | 6% |
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| 平均 CV | 7% |
每个样品在 4 个不同的实验中进行测量,并计算每个样品的 % CV。
- 应用:蛋白质定量
- 品牌:HTRF
- 检测方式:HTRF
- 产品类别:试剂盒
- 样品体积:16 µL
- 运输条件:干冰运输
- 目标类别:生物标志物
- 目标物种:人类
- 技术:TR-FRET
- 治疗领域:肿瘤学和炎症
- 单位规格:500 个检测点