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HTRF HUMAN IFN G KIT - 500 PTS 人的干扰素gamma测量试剂盒-500测试

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概述

IFN-γ 是一种促炎细胞因子，由 T 细胞和 NK 细胞在病毒感染或炎症条件下分泌。IFN-γ 在固有免疫和适应性免疫中起重要作用，可促进 T 细胞分化为 TH1 细胞和调节性 T 细胞（Treg），并抑制 T 细胞向 TH17 细胞分化。其抗肿瘤特性已用于治疗骨质疏松症，且在免疫肿瘤学领域备受关注，可改善膀胱癌或卵巢癌患者的生存率。

血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测法可能具有足够的灵敏度，能够检测血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板，使用 HTRF® 试剂（384 孔低体积白色板或 Cisbio 低体积 96 孔板，20 µl 体系）进行检测。预先混合标记有 HTRF 供体和受体的抗体，并通过单次加样步骤加入，以进一步简化检测流程。该检测可通过按比例调整各加样体积，直接扩展至 1536 孔板格式。

IFN-γ 试剂盒检测原理

检测数据分析

推荐使用四参数逻辑（4PL）曲线拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比，该回归模型可在更宽的浓度范围内准确测量未知样本，非常适合分析细胞因子释放等生物系统。

检测详情

人 IFN-γ 试剂盒技术规格

样本体积：16 µL
最终检测体积：20 µL
试剂盒组分：冻干标准品、冻存检测抗体、缓冲液及实验方案
检测限与定量限（在稀释液中）：14 pg/mL & 21 pg/mL
检测范围：21–4,000 pg/mL
出结果时间：室温孵育过夜
校准：NIBSC（82/587）值（IU/mL）= 0.019 × HTRF hIFN-γ 值（pg/mL）
适用物种：仅限人类

分析性能

批内与批间差异

批内检测（n=24）

样本	平均 [IFN-γ]（pg/mL）	变异系数（CV）
1	209	9%
2	835	11%
3	4367	7%
平均 CV	9%

每个样本检测 24 次，计算各样本的 % CV。

批间检测（n=4）

样本	[IFN-γ]（pg/mL）	平均（delta R）	变异系数（CV）
1	98	178	14%
2	432	788	9%
3	1905	3170	6%
平均 CV	9.7%

每个样本在 4 次不同实验中检测，计算各样本的 % CV。

稀释线性

实验获得的优异回收率表明该检测具有良好的线性。

样本	稀释倍数	[IFN-γ] 预期值（pg/mL）	[IFN-γ] 检测值（pg/mL）	回收率
1	1	-	150	-
	2.1	72.6	66	91%
	4.3	35	30	86%
	平均值	88%
2	1	-	1953	-
	2.1	942	959	102%
	4.3	454	450	99%
	平均值	100%

加标回收率

样本	[IFN-γ] 加入量（pg/mL）	[IFN-γ] 预期值（pg/mL）	[IFN-γ] 检测值（pg/mL）	回收率
1	2,000	2,421	2,086	86%
2	2,000	3,360	3,363	100%

将相同量的重组细胞因子加入 2 种不同血清样本，将标准曲线得到的响应值与计算的预期值比较。观察到的回收率接近 100%，验证了该检测所用的样本基质。

检测验证

PMA 和离子霉素刺激 PBMC 的 IFN-γ 分泌

将 PBMC 以 50、100、200 和 400 kcells / 孔铺板，用逐渐增加浓度的 PMA（0、1、50 ng/mL）加入 500 ng/mL 离子霉素溶液中刺激 3 小时。然后将 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔，低体积），使用人 IFN-γ 检测试剂盒进行分析。

规格

其他规格

应用：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类别：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：细胞因子
靶标物种：人类
技术：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域：肿瘤学与炎症
单位规格：500 检测点

没有数据

货号：62HIFNGPEG

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