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HTRF HUMAN IFN G KIT - 10K PTS 人的干扰素gamma测量试剂盒-10,000测试

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概述
IFN-γ（干扰素 -γ）是一种促炎细胞因子，由 T 细胞和 NK 细胞在病毒感染或炎症条件下分泌。IFN-γ 在固有免疫和适应性免疫中发挥重要作用，可促进 T 细胞分化为 TH1 细胞并诱导调节性 T 细胞（Treg）发育，同时抑制 T 细胞向 TH17 细胞分化。其抗肿瘤特性已被用于治疗骨质疏松症，且在免疫肿瘤学领域备受关注 —— 研究显示它能改善膀胱癌或卵巢癌患者的生存率。

血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测法可能具备足够灵敏度，可实现血清或血浆中低水平分析物的检测。

工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板（使用 HTRF® 试剂，检测板为 384 孔低体积白色板或 Cisbio 低体积 96 孔板，体积 20 µl）。预混合标记有 HTRF 供体和受体的抗体，并通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。该检测可扩展至 1536 孔板格式，仅需按比例调整各加样体积即可。

IFN-γ 试剂盒检测原理
检测数据分析
ELISA 标准曲线通常推荐使用四参数逻辑（4PL）曲线拟合。与线性分析相比，该回归模型可在更宽浓度范围内精确测定未知样本，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

检测详情
人 IFN-γ 试剂盒技术参数

样本体积：16 µL
最终检测体积：20 µL
试剂盒组分：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限与定量限（在稀释液中）：14 pg/mL & 21 pg/mL
检测范围：21–4,000 pg/mL
出结果时间：室温孵育过夜
校准：NIBSC（82/587）值（IU/mL）= 0.019 × HTRF 人 IFN-γ 值（pg/mL）
适用物种：仅限人类

分析性能
批内与批间检测
批内检测（n=24）

样本	平均 [IFN-γ]（pg/mL）	变异系数（CV）
1	209	9%
2	835	11%
3	4367	7%
	平均 CV	9%

每个样本检测 24 次，计算各样本的变异系数百分比（% CV）。

批间检测（n=4）

样本	[IFN-γ]（pg/mL）	平均（ΔR）	变异系数（CV）
1	98	178	14%
2	432	788	9%
3	1905	3170	6%
		平均 CV	9.7%

每个样本在 4 次不同实验中检测，计算各样本的变异系数百分比（% CV）。

稀释线性
实验获得的高回收率表明该检测具有良好的线性关系。
样本 1

稀释倍数	[IFN-γ] 预期值（pg/mL）	[IFN-γ] 检测值（pg/mL）	回收率
1	-	150	-
2.1	72.6	66	91%
4.3	35	30	86%
		平均	88%

样本 2

稀释倍数	[IFN-γ] 预期值（pg/mL）	[IFN-γ] 检测值（pg/mL）	回收率
1	-	1953	-
2.1	942	959	102%
4.3	454	450	99%
		平均	100%

加标回收率
| 样本 |[IFN-γ] 加入量（pg/mL）|[IFN-γ] 预期值（pg/mL）|[IFN-γ] 检测值（pg/mL）| 回收率 |
|----|----|----|----|
|1|2,000|2,421|2,086|86%|
|2|2,000|3,360|3,363|100%|

将相同量的重组细胞因子加入 2 种不同血清样本，将标准曲线得到的响应值与计算的预期值比较。观察到的～100% 回收率验证了该检测所用的样本基质。

检测验证
PMA 和离子霉素刺激的 PBMC 中 IFN-γ 的分泌
将 PBMC 以 50、100、200 和 400 千细胞 / 孔的密度铺板，用递增浓度的 PMA（0、1、50 ng/mL）加入 500 ng/mL 离子霉素溶液中刺激 3 小时。随后将 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔，低体积），使用人 IFN-γ 检测试剂盒进行分析。

IFN-γ 在 PMA 和离子霉素刺激的 PBMC 中的分泌

规格
其他规格

应用：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类型：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
目标类别：细胞因子
目标物种：人类
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：肿瘤与炎症
包装规格：10,000 次检测

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货号：62HIFNGPEH

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