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HTRF HUMAN IL6 KIT - 500 PTS 人白介素6测量试剂盒-500测试

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概述

IL-6 是一种促炎细胞因子，参与急性期反应、炎症和癌症进展。它由 T 细胞、巨噬细胞和成纤维细胞分泌，可诱导 B 细胞和 T 细胞增殖。目前该因子在多种研究领域中被探讨，包括糖尿病、阿尔茨海默病、抑郁症和多种癌症。与 TGF-β 共同作用时，IL-6 是推动 T 细胞分化为 TH17 细胞的主要促进因子，而 TH17 细胞是免疫肿瘤学的新组成部分。

血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测法可能具有足够的灵敏度，能够检测出血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板，使用 HTRF® 试剂（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，20 µl 体系）进行检测。预先混合标记有 HTRF 供体和受体的抗体，并通过单次加样步骤加入，以进一步简化检测流程。该检测可通过按比例调整各加样体积，直接扩展至 1536 孔板格式。

检测数据分析

推荐使用四参数逻辑（4PL）曲线拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比，该回归模型可在更宽的浓度范围内准确测量未知样本，非常适合分析细胞因子释放等生物系统。

检测详情

人 IL-6 试剂盒技术规格

样本体积：16 µL
最终检测体积：20 µL
试剂盒组分：冻干标准品、冻存检测抗体、缓冲液及实验方案
检测限与定量限（在稀释液中）：8 pg/mL & 34 pg/mL
检测范围：34–7,500 pg/mL
出结果时间：室温孵育 2 小时
校准：NIBSC（89/548）值（IU/mL）= 0.1 × HTRF hIL-6 值（pg/mL）
适用物种：仅限人类

分析性能

批内与批间差异

批内检测（n=24）

样本	平均 [IL-6]（pg/mL）	变异系数（CV）
1	384	5%
2	2522	3%
3	8594	3%
平均 CV	4%

每个样本检测 24 次，计算各样本的 % CV。

批间检测（n=4）

样本	[IL-6]（pg/mL）	平均（delta R）	变异系数（CV）
1	116.5	400	13%
2	268	1805	10%
3	3261	7834	2%
平均 CV	8%

每个样本在 4 次不同实验中检测，计算各样本的 % CV。

稀释线性

样本	稀释倍数	[IL-6] 预期值（pg/mL）	[IL-6] 检测值（pg/mL）	回收率
1	1	-	2015	-
	4.3	469	489	104%
	7.4	271	292	108%
	10.7	188	210	111%
	平均值	108%
2	1	-	354	-
	4.3	83	82	101%
	7.4	45	48	94%
	平均值	97%

实验获得的优异回收率表明该检测具有良好的线性。

加标回收率

样本	[IL-6] 加入量（pg/mL）	[IL-6] 预期值（pg/mL）	[IL-6] 检测值（pg/mL）	回收率
1	3250	4098	4103	100%

将重组细胞因子加入血清样本，将标准曲线得到的响应值与计算的预期值比较。观察到的 100% 回收率验证了该检测所用的样本基质。

检测验证

JTE607 抑制 THP1 细胞分泌 IL-6

将 THP1 细胞以 100 kcells / 孔铺板，在 2 µg/mL LPS 存在下用浓度递增的 JTE607 孵育 18 小时。然后将 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔低体积），使用人 IL-6 检测试剂盒进行分析。

LPS 刺激 PBMC 的 IL-6 分泌

将 PBMC 以 50、100 和 400 kcells / 孔铺板，用浓度递增的 LPS（0, 0.02, 0.2, 2 µg/mL）刺激 18 小时。然后将 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔低体积），使用人 IL-6 检测试剂盒进行分析。

规格

其他规格

应用：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类别：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：细胞因子
靶标物种：人类
技术：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域：代谢 / 糖尿病、NASH / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症
单位规格：500 检测点

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货号：62HIL06PEG

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参考价格 ¥ 11081.73

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