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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF HUMAN IL8 KIT - 500 PTS 人白介素8测量试剂盒-500测试

概述



IL8 也被称为 CXCL8,是一种主要由巨噬细胞、T 细胞和中性粒细胞产生的趋化因子。IL8 作为中性粒细胞的趋化因子,可促进炎症部位的浸润和激活。由于 IL8 能够促进血管生成和细胞增殖,并抑制细胞凋亡,因此它与多种癌症类型相关。


血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测方法可能具有足够的灵敏度,能够检测出血清或血浆中低水平的分析物。


工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接分配到检测板中,使用 HTRF® 试剂进行检测(384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板,体积为 20 µl)。将标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合,并通过单次分配步骤添加,以进一步简化检测流程。只需按比例调整每次添加的体积,该检测方法即可扩展至 1536 孔板格式。


细胞因子 - 工作原理 - 检测原理 - 人类
检测数据分析
通常建议使用四参数逻辑(4PL)曲线来拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比,这种回归方法能够在更广泛的浓度范围内准确测量未知样本,非常适合分析细胞因子释放等生物系统。


Revvity 还与 Myassays.com 合作,为您提供数据分析方面的帮助。


检测详情
人 IL8 试剂盒的技术规格
样本量:16 µL
最终检测体积:20 µL
试剂盒组件:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限和定量限(在稀释液中):6 pg/mL 和 32 pg/mL
检测范围:32 - 4,000 pg/mL
出结果时间:室温下 1 小时
校准:NIBSC(89/520)值(IU/mL)= 0.01 × HTRF hIL8 值(pg/mL)
适用物种:仅人类


分析性能
批内和批间差异
批内检测(n=24)


样本平均 [IL8](pg/mL)变异系数(CV)
1589%
23144%
320742%
平均变异系数5%


每个样本测量 24 次,并计算每个样本的变异系数百分比。


批间检测(n=4)


样本[IL8](pg/mL)平均(delta R)变异系数(CV)
1782732%
2376150412%
3181859905%


平均变异系数6.3%


每个样本在 4 个不同的实验中进行测量,并计算每个样本的变异系数百分比。


稀释线性


样本稀释因子[IL8] 预期值(pg/mL)[IL8] 检测值(pg/mL)回收率
11-2015-
4.3469489104%
7.4271292108%
10.7188210111%
平均值-

108%
21
399-
4.3938591%
7.45456103%
平均值


97%


这些实验中获得的出色回收率百分比表明该检测方法具有良好的线性。


加标回收率


样本[IL8] 添加量(pg/mL)[IL8] 预期值(pg/mL)[IL8] 检测值(pg/mL)回收率
150005179500897%
250006047568294%


将相同量的重组细胞因子添加到 2 个不同的血清样本中,并将从标准曲线获得的响应值与计算的预期值进行比较。约 100% 的回收率验证了该检测方法所用的样本基质。


检测验证
JTE607 抑制 THP1 细胞中 IL8 的分泌
将 THP1 细胞以 100,000 个细胞 / 孔的密度铺板,用不同浓度的 JTE607 孵育 18 小时,然后用 2 µg/mL 的 LPS 刺激 3 小时。然后将 16 µL 上清液转移到白色检测板(384 孔低体积)中,使用人 IL8 检测方法进行分析。


检测验证 - 人 IL8 - 2
LPS 刺激 PBMC 中 IL8 的分泌
将 PBMC 以 50,000、100,000、200,000 和 400,000 个细胞 / 孔的密度铺板,用不同浓度的 LPS(0、0.02、0.2、2 µg/mL)刺激 3 小时。然后将 16 µL 上清液转移到白色检测板(384 孔低体积)中,使用人 IL8 检测方法进行分析。


检测验证 - 人 IL8



规格



其他规格
应用:蛋白质定量
品牌:HTRF
检测方式:HTRF
产品类别:试剂盒
样本体积:16 µL
运输条件:干冰运输
目标类别:细胞因子
目标物种:人类
技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR - FRET)
治疗领域:肿瘤学与炎症
包装规格:500 次检测点


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