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HTRF HUMAN TNF ALPHA KIT - 10K PTS 人的肿瘤坏死因子alpha测量试剂盒-10,000测试

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品牌： Revvity

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概述

TNF-α 是一种主要由巨噬细胞、T 细胞和中性粒细胞产生的细胞因子。TNF-α 作为中性粒细胞的趋化因子，可促进炎症部位的浸润和活化。它通过促进血管生成、细胞增殖以及抑制细胞凋亡，参与多种癌症的发生发展。

血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测可能具有足够的灵敏度，能够检测出血清或血浆中低水平的分析物。检测时，请始终遵循推荐的实验方案，并避免使用高度溶血的样本。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中（使用 HTRF® 试剂进行检测，可选择 384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，体积为 20 µl）。将标记有 HTRF 供体和受体的抗体预混合后，通过单次加样步骤加入，以进一步简化检测流程。该检测可扩展至 1536 孔板格式，只需按比例调整每次加样的体积即可。

检测数据分析

推荐使用四参数逻辑（4PL）曲线拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比，该回归模型能够在更宽的浓度范围内准确测量未知样本，非常适合分析细胞因子释放等生物系统。

为了全面了解如何处理 HTRF 数据及 4PL 1/y² 拟合，Revvity 还与Myassays.com合作，为您提供数据分析支持。您可以访问免费的在线软件进行 TNF-α 的数据分析。

检测详情

人 TNF-α 试剂盒技术规格

样本体积：16 µL
最终检测体积：20 µL
试剂盒组分：冻干标准品、冻存检测抗体、缓冲液及实验方案
检测限与定量限（在稀释液中）：5 pg/mL & 29 pg/mL
检测范围：29-2,500 pg/mL
出结果时间：室温下 2 小时
校准：NIBSC（12/154）值（IU/mL）= 0.1 × HTRF hTNFα 值（pg/mL）
适用物种：仅限人类

分析性能

批内与批间检测

批内检测（n=24）

样本	平均 TNFα 浓度（pg/mL）	变异系数（CV）
1	113	6%
2	344	3%
3	1399	6%
	平均 CV	5%

每个样本检测 24 次，计算每个样本的 CV%。

批间检测（n=4）

样本	TNFα 浓度（pg/mL）	平均 delta R	变异系数（CV）
1	78	272	11%
2	312	911	7%
3	1250	2894	6%
			平均 CV 6%

每个样本在 4 次不同实验中检测，计算每个样本的 CV%。

稀释线性

实验中获得的优异回收率百分比表明该检测具有良好的线性。

样本	稀释倍数	预期 TNFα 浓度（pg/mL）	检测 TNFα 浓度（pg/mL）	回收率
1	1	-	2336	-
	3	782	898	115%
	4.3	543	567	104%
	10.7	218	252	116%
	平均			112%
2	1	-	449	-
	3	150	179	119%
	平均			119%

加标回收率

样本	加标 TNFα 浓度（pg/mL）	预期 TNFα 浓度（pg/mL）	检测 TNFα 浓度（pg/mL）	回收率
1	1,250	1,555	1,523	98%
2	1,250	1,874	1,892	101%

检测验证

JTE607 抑制 THP1 细胞分泌 TNF-α

将 THP1 细胞以 100,000 个细胞 / 孔的密度铺板，用不同浓度的 JTE607 孵育 18 小时，然后用 2 µg/mL LPS 刺激 3 小时。取 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔低体积），使用人 TNF-α 检测试剂盒进行分析。

LPS 刺激 PBMC 分泌 TNF-α

将 PBMC 以 50,000、100,000、200,000 和 400,000 个细胞 / 孔的密度铺板，用不同浓度的 LPS（0、0.02、0.2、2 µg/mL）刺激 3 小时。取 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔低体积），使用人 TNF-α 检测试剂盒进行分析。

规格参数

其他规格

应用：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类型：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：细胞因子
靶标物种：人类
技术：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域：代谢 / 糖尿病、NASH / 肝纤维化、肿瘤与炎症
包装规格：10,000 次检测

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货号：62HTNFAPEH

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