HTRF IP-One 检测可用于检测肌醇单磷酸(inositol monophosphate)的积累,该物质是磷脂酶 C(PLC)级联反应激活后诱导产生的 IP3 的稳定下游代谢产物。该试剂盒可直接表征作用于 Gq 偶联受体的所有类型化合物,适用于贴壁细胞或悬浮细胞。
从高通量筛选(HTS)到构效关系(SAR)研究,IP-One 检测已被证实比传统检测具有更显著的优势。
该试剂盒基于竞争法设计,涉及一种标记穴状化合物(供体)的特异性抗体,以及偶联 d2(受体)的 IP1。细胞产生的内源性 IP1 与 d2 标记的 IP1 竞争结合抗 IP1 Tb²⁺穴状化合物单克隆抗体。向细胞刺激缓冲液中加入 LiCl,可使受体激活后 IP1 发生积累。
IP-One 检测流程简洁,仅需两个孵育步骤:
- 配体或目标化合物刺激细胞
- 使用 HTRF 试剂检测 IP1
该流程在细胞刺激后仅需单次 1 小时的孵育。
IP-One 检测可确保信号特异性,仅测量 IP-1—— 一种仅由磷脂酶(PLC)作用产生且由 G 蛋白偶联受体(GPCR)介导的分析物。
相比之下,钙反应本质复杂。钙释放常由非 G 蛋白机制触发,包括 Ca²⁺ permeable 通道、钙泵和钙转运蛋白。
检测窗口、灵敏度、重现性和特异性:IP-One 检测在这些方面均表现优异!
- 应用:第二信使检测
- 品牌:HTRF
- 检测方式:HTRF
- 产品类别:试剂盒
- 样本体积:14 微升
- 运输条件:常温运输
- 靶标类别:G 蛋白偶联受体(GPCR)
- 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
- 治疗领域:心血管疾病、感染性疾病、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
- 单位规格:20,000 次检测