HTRF HU. TNFA/TNFR1 BIND. KIT - 500 PTS 肿坏因子/肿坏因子受体1结合试剂盒 –500测试

产品概述

肿瘤坏死因子（TNF）信号通路的失调在慢性炎症的发生和持续中发挥着重要作用，并已被证实与多种自身免疫性疾病的发生发展相关。TNFα抑制剂已成功用于类风湿性关节炎和银屑病等多种疾病的治疗。

相较于其他技术，HTRF（均相时间分辨荧光）检测方案具有诸多优势：

• 均相“加样-读取”模式

• 无需洗涤步骤

• 背景信号低

• 可直接从96或384孔微板小型化至384孔低容量及1536孔等高密度检测规格

• 信号稳定，为读取时间或检测规模提供灵活的操作窗口

工作原理

检测原理
HTRF TNFα/TNFR1 结合检测试剂盒旨在检测TNFα与TNFR1蛋白之间的相互作用。在未经处理的情况下，TNFα与TNFR1结合，各检测抗体与其对应标签蛋白的结合产生HTRF信号。在待测化合物或抗人阻断抗体存在的情况下，TNFα/TNFR1相互作用被破坏，HTRF信号随之降低。

检测方案
本试剂盒可在96孔或384孔低容量白色微孔板（终体积20 µL）中运行。操作流程如下：将样品或标准品直接分装至检测板中，随后加入Tag1-TNFα蛋白和Tag2-TNFR1蛋白，接着分装HTRF检测试剂（即铕穴状化合物标记的Tag1抗体，以及XL665标记的Tag2试剂）。HTRF荧光基团标记的试剂可预先混合并在单个分装步骤中添加。整个过程无需洗涤步骤。该方案还可通过按比例调整各添加体积，实现进一步的小型化或放大化。

检测验证

TNFα/TNFR1阻断剂的抑制效应
分别测试了未标记的小分子TNFR1和TNFα、人抗TNFα抗体（阿达木单抗，Adalimumab）以及小鼠抗TNFR1的抑制效应。抗TNFR2抗体未观察到任何抑制效应，从而证实了该试剂盒用于研究TNFα/TNFR1相互作用的特异性。

技术规格