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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF 6HIS CHECK KIT GOLD - 500 PTS 6His标签蛋白检测试剂盒 - 500测试

产品概述

本试剂盒可在蛋白生产和纯化的各阶段快速检测带有6His标签的融合蛋白。它既可用于确认融合蛋白的6His基序是否可被抗6His抗体识别,也可用于估算6His标签蛋白的浓度。

通过使用合适的蛋白进行校准,该检测具有很高的准确性,且与标准操作规程(SOPs)兼容。它还可用于排除假阳性结果,并预测使用镍柱纯化该蛋白的可行性:使用本检测试剂盒无法检出的标签将无法用于纯化。


工作原理

检测原理
如图所示,XL665标记的6His肽段可被抗6His穴状化合物偶联物(抗标签穴状化合物)检测。待测的6His标签融合蛋白与6His肽段-XL665偶联物竞争结合抗6His-穴状化合物偶联物。特异性信号与6His标签融合蛋白的浓度成反比。

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检测方案
右侧示例描述的是终体积20 µL的检测方案。向孔中依次加入10 µL标准品或待测6His标签蛋白、5 µL 6His-铕穴状化合物偶联物和5 µL 6His-XL665偶联物。室温孵育2小时后读取信号。

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检测验证

6His检测试剂盒Gold版对多种6His标签蛋白的检测性能
6His检测试剂盒Gold版能够检测6His标签蛋白,无论其分子量大小及6His标签的插入位置(N端、C端及内部6His标签)如何。不同融合蛋白的6His标签检测信号存在差异。

对于样品中6His标签蛋白的定量测定,我们建议使用内部校准品(与待测6His标签蛋白相近的6His融合蛋白)。

6His-MBP-GST-Flag和THX-6His-1509V3蛋白由Hybrigenics公司惠赠。

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标签位置6His标签蛋白分子量(Da)定量限或IC₁₀(nM)IC₅₀(nM)
N端6His-肽段1,3004.232.8

6His-BRD4(1)17,80017.6105.0

6His-SNAP20,60031.4244.8

6His-MBP-GST-Flag*64,0003.228.0
内部THX-6His-1509V3*27,0003.024.8
C端6His标签纳米抗体15,0002.924.48


技术规格

项目详情
应用蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-Protein Interaction)
自动化兼容是(Yes)
品牌HTRF
检测方式HTRF
产品组别试剂盒(Kit)
样本体积10 µL
运输条件干冰运输(Shipped in Dry Ice)
靶点6His
靶点类别结合检测(Binding Assay)
技术平台TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
疗法领域心血管(Cardiovascular)、感染性疾病(Infectious Diseases)、炎症(Inflammation)、代谢/糖尿病(Metabolism/Diabetes)、NASH/纤维化(NASH/Fibrosis)、神经科学(Neuroscience)、肿瘤学与炎症(Oncology & Inflammation)、罕见病(Rare Diseases)
单位规格500个检测点(500 assay points)


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