当前位置：首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF TAU P-S404 KIT - 10K PTS

HTRF TAU P-S404 KIT - 10K PTS

分享给好友

rvty_ls_sds_64TS4PEH_US rvty_ls_sds_64TS4PEH_UK rvty_ls_sds_64TS4PEH_SPA rvty_ls_sds_64TS4PEH_ITA rvty_ls_sds_64TS4PEH_ELL rvty_ls_sds_64TS4PEH_DEU rvty_ls_sds_64TS4PEH_FRA

收藏咨询

品牌： Revvity

产品详情
相关解决方案
相关资源
相关视频
相关问答

概述

HTRF 磷酸化 TAU（Ser404）细胞检测试剂盒是定量内源性丝氨酸 404 位点磷酸化 TAU 的理想工具。在阿尔茨海默病（AD）和帕金森病（PD）中，TAU 存在不同状态。

TAU 过度磷酸化也是多种神经退行性疾病和中枢神经系统疾病的标志物。

工作原理

磷酸化 TAU（Ser404）检测原理
磷酸化 TAU（Ser404）检测用于测定在 Ser404 位点发生磷酸化的 TAU。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。

磷酸化 TAU（Ser404）检测采用两种标记抗体：一种标记有供体荧光团，另一种标记有受体荧光团。第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则能不依赖于蛋白质的磷酸化状态对其进行识别。蛋白质磷酸化会促使形成包含两种标记抗体的免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比，且该检测采用无需洗涤的格式即可评估蛋白质的磷酸化状态。

磷酸化 tau（Ser404）
磷酸化 TAU（Ser404）双板检测方案
双板方案包括先在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至 384 孔低体积检测板，再加入磷酸化 TAU（Ser404）HTRF 检测试剂。

该方案可监测细胞活力和汇合度。

磷酸化 tau（Ser404）双板检测方案
磷酸化 TAU（Ser404）单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测磷酸化 TAU（Ser202/Thr205）可在单个平板中完成，该平板可用于细胞培养、刺激和裂解，无需洗涤步骤。

这种为高通量筛选（HTS）设计的方案可实现微型化，同时保持稳定可靠的 HTRF 检测质量。

磷酸化 tau（Ser404）单板检测方案

检测验证

过表达 Tau P301L 突变体的 HEK293 细胞中 TAU S404 的高磷酸化水平
将 300 万个 HEK293 细胞接种到 100mm 培养皿中，在 37°C、5% CO₂条件下孵育 72 小时。将 10µg TAU P301L 质粒 / 30µL 脂质体 2000 与 5mL 细胞培养基混合，孵育 24 小时。

移除培养基后，用 1.5mL 裂解缓冲液在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟。

离心 10 分钟后收集可溶性组分。将 16µL 可溶性组分转移至 384 孔 sv 白色微孔板中，并加入 4µL HTRF 检测试剂。

孵育过夜后记录 HTRF 信号。

磷酸化 tau（Ser404）检测验证
碱性磷酸酶处理可消除 TAU 在 Ser404 位点的磷酸化
将 50,000 个人类 SH-SY5Y 细胞接种到 96 孔板中，在 37°C、5% CO₂条件下孵育 72 小时。移除培养基，用 50µL 裂解缓冲液在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟。

加入含适当缓冲液的碱性磷酸酶（25U），1 小时后移除。将 16µL 裂解物转移至 384 孔 sv 白色微孔板中，并加入 4µL HTRF 磷酸化 TAU（Ser404）检测试剂。孵育过夜后记录 HTRF 信号。

磷酸化 tau（Ser404）检测验证
HTRF 与蛋白质印迹法的比较
人类 SH-SY5Y 细胞在 T175 培养瓶中于 37°C、5% CO₂条件下培养至 80% 汇合度。弃去细胞培养基，用 3mL 补充的裂解缓冲液在室温下裂解细胞 30 分钟。离心 10 分钟后收集可溶性组分。将细胞裂解物用补充的裂解缓冲液进行系列稀释，取 16µL 各稀释液分别进行蛋白质印迹法和 HTRF 检测的平行分析。

使用 HTRF 磷酸化 TAU（Ser404）细胞检测，仅需 2,500 个细胞即可检测到最低信号，而蛋白质印迹法则需要 10,000 个细胞才能产生信号。

HTRF 细胞检测的灵敏度至少是蛋白质印迹法的 4 倍。

磷酸化 tau（Ser404）检测验证

简化通路
阿尔茨海默病通路与 TAU 的作用
TAU 在阿尔茨海默病的发病机制中起着重要作用。它会发生过度磷酸化并聚集形成纤维，进而可浓缩成神经原纤维缠结。TAU 聚集物可能通过类似朊病毒的方式在细胞间传播，从而加剧病理进程。调节 TAU 过度磷酸化并减少 TAU 聚集的药物是可行的治疗手段。

TAU 蛋白的生理作用是促进微管的组装和稳定。目前已发现 6 种 TAU 亚型，由外显子 2、3 和 10 选择性剪接产生，氨基酸残基数为 352-441。最长的 TAU 亚型（TAU-441）含有 85 个潜在磷酸化位点，其中一半已通过实验证实。

磷酸化通路 tau 磷酸化 s404 试剂盒

规格

其他规格
应用
细胞信号传导
品牌
HTRF
检测方式
HTRF
裂解缓冲液兼容性
1 号裂解缓冲液
3 号裂解缓冲液
4 号裂解缓冲液
5 号裂解缓冲液
分子修饰
磷酸化
产品类别
试剂盒
样品体积
16µL
运输条件
干冰运输
靶标类别
磷蛋白
靶标物种
人类
技术
时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域
神经科学
单位规格
10,000 次检测点

没有数据

货号：64TS4PEH

一键复制

参考价格 ¥ 172916.60

产品规格

请咨询￥172916.60

参考货期：3-4周

选择数量

当前规格1件起购

加入购物车询价