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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF MAb Anti FLAG-Tb, 1,000 Assay Points

概述

抗 FLAG - Tb 隐花青单克隆抗体(MAb Anti FLAG-Tb cryptate)是一种针对用 Tb 隐花青标记的 FLAG® 融合蛋白而制备的抗体。该抗 FLAG 抗体能够识别 FLAG 融合蛋白 N 端、内部或 C 端的 FLAG 序列。


这种试剂可用于生化和细胞实验中,以研究多种相互作用,包括蛋白质 / 蛋白质、蛋白质 / 肽、蛋白质 / DNA、蛋白质 / RNA、蛋白质 / 碳水化合物、蛋白质 / 小分子以及受体 / 配体之间的相互作用。


均相时间分辨荧光共振能量转移技术(HTRF)能够检测从皮摩尔到低毫摩尔范围的广泛亲和常数。

规格

  • 其他规格
    • 应用领域:蛋白质 - 蛋白质相互作用
    • 品牌:HTRF
    • 检测方式:HTRF
    • 产品类别:荧光试剂
    • 运输条件:常温运输
    • 目标类别:结合分析
    • 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
    • 包装规格:1000 次检测用量

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中,一个相互作用伙伴(直接或间接)用供体标记,另一个用受体标记(同样,直接或间接)。产生的信号强度与这两个相互作用伙伴的结合程度成正比。在此处所示的示例中,抗 FLAG - Tb 隐花青单克隆抗体与带有 FLAG 标签的伙伴 A 结合,而伙伴 B * 则与用 HTRF 受体标记的特定抗体结合。


* 伙伴 B 也可以是生物素化的、带标签的或与 Fc 融合的。在这些情况下,使用相应的用受体标记的 HTRF 试剂(抗标签抗体、抗物种抗体、蛋白 A、链霉亲和素)进行检测。

Principle of the HTRF Anti FLAG-Tb assay

检测方案

右侧的示例描述了最终检测体积为 20 微升的方案,用于检测带有 FLAG 标签的伙伴 A 与未标记的伙伴 B * 之间的相互作用。加入两个伙伴(各 10 微升),孵育,加入抗 FLAG - Tb 隐花青单克隆抗体(5 微升)和用受体标记的抗伙伴 B 抗体(5 微升),然后孵育并读数。


* 伙伴 B 也可以是生物素化的、带标签的、与 Fc 融合的或直接标记的。在这些情况下,使用相应的用受体标记的 HTRF 试剂(抗标签抗体、抗物种抗体、蛋白 A、链霉亲和素)进行检测。

Assay protocol of the HTRF Anti FLAG-Tb assay

检测详情

检测次数与活性成分有何关系?

每孔的平均偶联物数量反映了整体生物材料的含量。通常,使用活性成分的量比使用总偶联物的量更可取。对于隐花青(Cryptate)和 d2 偶联物,总偶联物的量等于活性成分的量,因为标记物的分子量可忽略不计。对于 XL665 标记的实体来说并非如此,其总偶联物的量会根据 XL665 偶联物的最终摩尔比而变化。然而,由 Revvity 公司提供的活性成分的量是恒定的,且基于订购的检测次数。

assay specifications Flag-Tb


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