产品概述

山羊抗人免疫血清中的免疫球蛋白 G（IgG）经免疫纯化后，标记铕穴状化合物（Eu Cryptate），即多克隆抗体抗人 IgG - 铕穴状化合物（PAb Anti Human IgG-Eu Cryptate）。该试剂可用于检测未标记的人特异性抗体与靶分子或免疫球蛋白融合蛋白的结合情况，适用于生化和细胞水平的多种相互作用研究，包括蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子、受体 / 配体等。HTRF 技术可覆盖从皮摩尔（picomolar）到低毫摩尔（low millimolar）范围的亲和力常数检测，适配不同强度的分子相互作用分析需求。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中，一对相互作用的分子需分别（直接或间接）标记供体荧光团和受体荧光团，信号强度与两者的结合程度呈正相关。本试剂典型应用示例：抗人 IgG - 铕穴状化合物多克隆抗体与含有人 Fc 融合标签的分子 A 特异性结合，而分子 B * 与标记 HTRF 受体的特异性抗体结合（* 分子 B 也可进行生物素化、带标签、Fc 融合修饰，此时需搭配相应的 HTRF 受体标记试剂，如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等完成检测）。（标注：PPI How it works assay principle htrf pab anti human igg eu cryptate 61hfckla 为图表标识，对应 “抗人 IgG - 铕穴状化合物 HTRF 检测原理”）

检测流程

以下为终体积 20 µL 的标准检测流程，适用于检测含有人 Fc 融合标签的分子 A 与非标记分子 B * 的相互作用：

1. 向检测板中加入两种待检测相互作用分子（共计 10 µL），进行孵育；
2. 加入抗人 IgG - 铕穴状化合物多克隆抗体（5 µL）和受体标记的抗分子 B 抗体（5 µL），孵育后通过 HTRF 兼容检测仪读取信号。（* 分子 B 也可进行生物素化、带标签、Fc 融合修饰或直接标记，此时需替换为相应的 HTRF 受体标记试剂，如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等进行检测）

（标注：PPI How it works assay protocol htrf pab anti human igg eu cryptate 61hfckla 为图表标识，对应 “抗人 IgG - 铕穴状化合物 HTRF 检测流程”）

检测详情

检测次数与活性成分的关联逻辑

每孔偶联物的平均用量反映总生物材料负载量，实际应用中优先参考活性成分含量（而非总偶联物质量）。对于铕穴状化合物（Cryptate）和 d2 标记偶联物，由于标记物分子量极小可忽略不计，总偶联物量与活性成分量基本一致；而 XL665 标记偶联物的总偶联物量会因 XL665 与抗体的最终摩尔偶联比不同而变化，但 Revvity 提供的活性成分量恒定，且严格匹配订购的检测次数。

推荐的铕穴状化合物与 XL665 偶联物用量标准

• 铕穴状化合物偶联物需控制用量，避免导致检测仪信号饱和及背景信号过高，多数实验场景下 1–5 nM 的浓度最为适宜，根据所使用的 HTRF 兼容检测仪型号不同，在 620 nm 波长下可产生 20,000–80,000 cps 的稳定信号。
• XL665 偶联物（受体标记）的浓度需尽可能与检测靶点浓度匹配，以确保最大比例的生物分子被 XL665 受体标记。例如，若检测靶点的反应体系浓度为 20 nM，抗标签 - XL665 偶联物的浓度应达到等摩尔或更高水平，以保证结合效率。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测（Protein-Protein Interaction）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：荧光试剂（Fluorescent Reagent）
• 运输条件：室温运输（Shipped Ambient）
• 靶标类别：生物制品（Biologics）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：心血管疾病（Cardiovascular）、感染性疾病（Infectious Diseases）、炎症（Inflammation）、代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化（NASH/Fibrosis）、神经科学（Neuroscience）、肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）、罕见病（Rare Diseases）
• 单位规格：5,000 次检测（5,000 assay points）