HTRF PAB ANTI HUMAN IGG-XL665 - 20K PTS 免疫球蛋白XL665测量试剂 -20°C，000测试

产品概述

该产品的活性成分源自山羊抗人免疫血清，其中的免疫球蛋白 G（IgG）经免疫纯化工艺处理后，标记 XL665 荧光基团，形成高特异性的多克隆抗体抗人 IgG-XL665。此试剂可精准检测未标记的人特异性抗体与靶分子，或免疫球蛋白融合蛋白之间的结合反应，为分子相互作用研究提供高灵敏度检测工具。试剂适用于生化与细胞两种实验体系，能够广泛支持多种类型的相互作用研究，涵盖蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子及受体 / 配体相互作用。依托 HTRF 技术的核心优势，其可检测的亲和力常数范围覆盖皮摩尔（picomolar）至低毫摩尔（low millimolar）级别，灵活适配不同强度的分子相互作用分析场景，满足基础研究与药物研发等多样化需求。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系中，参与相互作用的两种分子需分别通过直接或间接方式标记供体荧光团与受体荧光团，检测产生的信号强度与两者的结合程度呈正相关。本试剂的典型应用示例：抗人 IgG-XL665 多克隆抗体与带有人 Fc 融合标签的分子 A 特异性结合，而分子 B * 则与标记 HTRF 供体的特异性抗体结合。若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合等修饰，可选用对应的 HTRF 供体标记试剂（如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等）完成检测，确保实验灵活性与适用性。（标注：PPI how it works assay principle htrf pab anti human igg xl665 61hfcxla 为图表标识，对应 “抗人 IgG-XL665 HTRF 检测原理”）

检测流程

以下为终反应体积 20 µL 的标准检测流程，适用于检测带有人 Fc 融合标签的分子 A 与非标记分子 B * 的相互作用，具体步骤如下：

1. 向检测板中加入两种待检测相互作用分子（共计 10 µL），按照实验需求进行孵育；
2. 加入 5 µL 抗人 IgG-XL665 多克隆抗体及 5 µL 供体标记的抗分子 B 抗体，孵育完成后，通过 HTRF 兼容检测仪读取信号即可完成检测。

若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合修饰或直接标记，需替换为对应的 HTRF 供体标记试剂（如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等）进行检测，适配不同实验设计需求。（标注：PPI how it works assay protocol htrf pab anti human igg xl665 61hfcxla 为图表标识，对应 “抗人 IgG-XL665 HTRF 检测流程”）

检测详情

定制专属 HTRF 相互作用检测方案

• 试剂按检测次数（20 µL 反应体系 / 次）销售，XL665 或 d2 标记抗体的标准用量为每孔 20 ng 抗体，产品说明书中会明确标注每瓶试剂的活性成分含量及标记物数量（活性成分为偶联物的功能活性部分，如抗体的抗原结合结构域）。
• 关键参数说明（5,000 次检测规格参考）：靶标物种为人类免疫球蛋白，抗体类型为山羊多克隆抗体，特异性针对人 Fc 段免疫球蛋白；活性成分含量方面，铕偶联物为 10 µg，XL665 偶联物为 100 µg。

检测次数与活性成分的关联逻辑

每孔偶联物的平均用量反映总生物材料负载量，实际应用中优先参考活性成分含量（而非总偶联物质量）更具科学性。对于铕穴状化合物（Cryptate）和 d2 标记偶联物，由于标记物分子量极小可忽略不计，总偶联物量与活性成分量基本一致；而 XL665 标记偶联物的总偶联物量会因 XL665 与抗体的最终摩尔偶联比不同而变化，但 Revvity 提供的活性成分量恒定，且严格匹配订购的检测次数，确保实验重复性与结果可靠性。

推荐的铕穴状化合物与 XL665 偶联物用量标准

• 铕穴状化合物偶联物（供体）：用量需严格控制，过量使用易导致检测仪信号饱和及背景信号过高，影响检测准确性。多数实验场景下 1–5 nM 的浓度最为适宜，根据所使用的 HTRF 兼容检测仪型号不同，在 620 nm 波长下可产生 20,000–80,000 cps（计数 / 秒）的稳定信号。
• XL665 偶联物（受体）：浓度需尽可能与检测靶点浓度匹配，以确保最大比例的生物分子被 XL665 受体标记。例如，若检测靶点的反应体系浓度为 20 nM，抗标签 - XL665 偶联物的浓度应达到等摩尔或更高水平，以保证结合效率，提升检测信号的特异性与灵敏度。

检测验证

CD28/CD86 结合 assay 验证

CD28 为 CD4 阳性 T 细胞提供主要的共刺激信号，其与天然配体 CD80（B7-1）和 CD86（B7-2）结合后，会在 T 细胞活化过程中产生信号，该信号是白细胞介素 - 2 产生所必需的。借助 HTRF 试剂（含本产品）开发了 CD28 与 CD86 结合拮抗剂的筛选 assay：将 CD28 和 CD86 分别标记人 IgG Fc 片段和大鼠 IgG Fc 片段，通过 XL665 标记的抗人抗体（本产品）检测 CD28；CD86 以大鼠 Ig 结构域融合蛋白形式表达，先用生物素化抗体识别，再通过链霉亲和素 - 铕穴状化合物结合完成检测。相关研究结果已发表于《J Biomol Screening》（1998;3: 91-99），证实了本试剂在蛋白 - 蛋白相互作用检测中的可靠性与适用性。（标注：PPI assay validation cd28 cd86 binding assay 61hfcxla 为图表标识，对应 “CD28/CD86 结合 assay 验证结果”）

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测（Protein-Protein Interaction）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：荧光试剂（Fluorescent Reagent）
• 运输条件：室温运输（Shipped Ambient）
• 靶标类别：生物制品（Biologics）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 适用治疗领域：心血管疾病（Cardiovascular）、感染性疾病（Infectious Diseases）、炎症（Inflammation）、代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化（NASH/Fibrosis）、神经科学（Neuroscience）、肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）、罕见病（Rare Diseases）
• 单位规格：20,000 次检测（20,000 assay points）