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前列腺素 E2(Prostaglandin E2,简称 PGE2)可由多种细胞产生,其合成以花生四烯酸代谢的主要产物 —— 前列腺素 H2(PGH2)为前体,通过前列腺素合酶催化生成。PGE2 具有多种生物学功能,如舒张血管、松弛平滑肌,同时参与促炎和抗炎通路。检测 PGE2 的生成量是监测环氧合酶 1(COX-1)和环氧合酶 2(COX-2)活性调控的常用手段。本 PGE2 检测试剂盒是一种高灵敏度的定量检测方法,既可用于检测细胞上清液中的 PGE2,也可直接检测完整细胞内的 PGE2。
PGE2 检测基于竞争结合原理:细胞产生的天然 PGE2 与 d2 标记的 PGE2 会竞争结合铕穴状化合物(Europium Cryptate)标记的抗 PGE2 单克隆抗体。该检测可适用于多种类型的样本,如细胞上清液或纯化酶样本。(图示:prostaglandin-e2-kit,前列腺素 E2 检测试剂盒相关图示)
PGE2 检测采用简化流程,在加样和加入 PGE2 检测试剂后,仅需 1 步孵育操作。该流程需在室温(RT)条件下进行单次孵育,孵育时间为 5 小时。(图示:prostaglandin-e2-kit,前列腺素 E2 检测试剂盒相关图示)
PGE2 检测具有高度灵活性:既可使用细胞上清液进行检测,也可直接对经刺激处理的细胞进行检测。加入检测试剂后的孵育时间和温度对检测结果影响较小,进一步提升了实验操作的灵活性。
(图示:prostaglandin-e2-kit,前列腺素 E2 检测试剂盒相关图示)
吲哚美辛(Indomethacin)抑制剂处理对 PGE2 水平的调控作用HTRF PGE2 检测的优势之一是:即使样本中存在细胞,仍可实现 PGE2 的准确定量,且不会影响检测性能。直接基于细胞的检测结果与细胞上清液转移后的检测结果无显著差异。在有无吲哚美辛(一种已知的 PGE2 生成抑制剂)存在的条件下,刺激单核细胞产生 PGE2。通过 HTRF 技术测得的吲哚美辛半数抑制浓度(IC50)为 1.0±0.4 纳摩尔 / 升(nM),与已发表的文献数据一致。(图示:prostaglandin-e2-kit,前列腺素 E2 检测试剂盒相关图示)