概述

胰高血糖素（Glucagon）检测试剂盒对血清和血浆样本中的胰高血糖素具有极高的特异性和灵敏度，可实现可靠定量。该检测基于完全均相的实验方案，无需任何洗涤或复杂的提取步骤，相比酶联免疫吸附试验（ELISA）方法能显著节省时间。只需加入检测试剂、孵育后读数即可完成检测！

作用原理

检测原理

胰高血糖素的检测采用夹心免疫检测法，使用两种单克隆抗体：一种标记有 Lumi4 - 铽穴状化合物（供体），另一种标记有 d2（受体）。所获得的荧光共振能量转移（FRET）信号强度与样本中胰高血糖素的浓度呈正比。（图示：glucagon-serum-kit，胰高血糖素血清检测试剂盒相关图示）

检测方案

取 10 微升细胞上清液，加入 5 微升受体标记抗体和 5 微升供体标记抗体（或加入 10 微升预混合试剂，实现单次加样）。将混合液在室温（RT）下孵育 4 小时至过夜，随后在兼容均相时间分辨荧光（HTRF）技术的读数仪上读取结果。（图示：glucagon-serum-kit，胰高血糖素血清检测试剂盒相关图示）

检测详情

特异性

• 胰高血糖素（Glucagon）：识别率 100%
• 促胃酸激素（Oxyntomodulin）：识别率＜0.07%
• 胰高血糖素原（Glicentin）：识别率＜0.07%
• 胰高血糖素片段 1-18（Glucagon fragment 1-18）：识别率＜1.81%
• 胰高血糖素片段 19-29（Glucagon fragment 19-29）：识别率＜0.03%
• 胰高血糖素样肽 - 1（7-36）酰胺（GLP-1 (7-36) amide）：识别率＜0.06%
• 胰高血糖素样肽 - 1（7-37）（GLP-1 (7-37)）：识别率＜0.11%
• 胰高血糖素样肽 - 2（GLP-2）：识别率＜0.3%
• 胰高血糖素原相关胰多肽（GRPP，Glicentin-Related Pancreatic Peptide）：识别率＜0.01%

灵敏度

以下为使用 384 孔低体积白色检测板，在细胞培养基条件下稀释胰高血糖素标准品（最终反应体积 20 微升）所获得的典型标准曲线。样本在室温下孵育过夜，并使用 6 号稀释液稀释。该检测的线性范围为 15.6–2000 皮克 / 毫升（pg/mL），测得的检测限为 12 皮克 / 毫升（pg/mL）（使用 PHERAstar FS 读数仪，闪光灯激发）。（图示：glucagon-serum-kit，胰高血糖素血清检测试剂盒相关图示）

线性

对细胞培养基中的稀释线性进行了评估，回收率结果在 100%–117% 之间。收集人血清样本，使用 6 号稀释液进行系列稀释，结果以 “实测值占预期值的百分比” 表示。（图示：glucagon-serum-kit，胰高血糖素血清检测试剂盒相关图示）人血清样本使用 6 号稀释液进行系列稀释的结果如下：

• 未稀释：胰高血糖素实测浓度 1666.7 皮克 / 毫升（pg/mL），无预期浓度
• 1:2 稀释：胰高血糖素实测浓度 846.3 皮克 / 毫升（pg/mL），预期浓度 833.3 皮克 / 毫升（pg/mL），占预期浓度的 101.6%
• 1:4 稀释：胰高血糖素实测浓度 420.7 皮克 / 毫升（pg/mL），预期浓度 416.7 皮克 / 毫升（pg/mL），占预期浓度的 101.0%
• 1:8 稀释：胰高血糖素实测浓度 221.7 皮克 / 毫升（pg/mL），预期浓度 208.3 皮克 / 毫升（pg/mL），占预期浓度的 106.4%
• 1:16 稀释：胰高血糖素实测浓度 121.8 皮克 / 毫升（pg/mL），预期浓度 104.2 皮克 / 毫升（pg/mL），占预期浓度的 116.9%

批内与批间变异

对细胞培养基条件下的批内和批间变异进行了评估。结果显示，批内变异系数（CV）通常低于 4%，批间变异系数（CV）通常低于或约为 10%，这表明该检测方法具有良好的稳健性和可重复性。

批内检测（n=24）

• 标准品 2（浓度 = 31.25 皮克 / 毫升）：变异系数（CV）1.8%
• 标准品 6（浓度 = 500 皮克 / 毫升）：变异系数（CV）1.9%
• 标准品 8（浓度 = 2000 皮克 / 毫升）：变异系数（CV）3.6%

批内检测（n=6）

• 标准品 2（浓度 = 31.25 皮克 / 毫升）：变异系数（CV）11.2%
• 标准品 6（浓度 = 500 皮克 / 毫升）：变异系数（CV）6.6%
• 标准品 8（浓度 = 2000 皮克 / 毫升）：变异系数（CV）6.4%

检测验证

胰高血糖素的正常水平与病理水平

使用均相时间分辨荧光（HTRF）血清胰高血糖素检测试剂盒试剂，对 16 份病理状态和正常状态的乙二胺四乙酸（EDTA）血浆样本中的胰高血糖素浓度进行了测定。结果表明，该胰高血糖素检测方法具有良好的区分能力，可清晰区分胰高血糖素的正常水平与病理水平。（图示：glucagon-serum-kit，胰高血糖素血清检测试剂盒相关图示）

规格参数

其他规格

• 应用领域（Application）：蛋白质定量（Protein Quantification）
• 品牌（Brand）：HTRF
• 检测方式（Detection Modality）：HTRF（均相时间分辨荧光技术）
• 产品类别（Product Group）：试剂盒（Kit）
• 样本体积（Sample Volume）：10 微升（10 µL）
• 运输条件（Shipping Conditions）：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别（Target Class）：生物标志物（Biomarkers）
• 技术平台（Technology）：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移技术）
• 治疗领域（Therapeutic Area）：代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）
• 单位规格（Unit Size）：200 个检测点（200 assay points）