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人源 1 型前胶原(human pro-collagen type 1)由两条前 α1 链与一条前 α2 链共同结合形成。这些呈三链绳状结构的前胶原分子,需在细胞外经酶加工处理形成原纤维,原纤维进一步交联后,才能生成坚韧的成熟 1 型胶原纤维。人源 1 型前胶原检测试剂盒专为定量检测人源 1 型前胶原设计,可适用于细胞上清液、完整细胞或重组蛋白提取物样本。
人源前胶原的检测采用夹心免疫检测法,使用两种特异性抗人源前胶原抗体:一种标记有铕 - 穴状化合物(Europium Cryptate,供体),另一种标记有 d2(受体)。检测信号的强度与样本中人源前胶原的浓度呈正比。(图示:assay-principle-human-pro-collagen-type-1-63adk014peg,人源 1 型前胶原检测原理相关图示)
以下为人源 1 型前胶原检测方案,该方案使用 384 孔低体积白色检测板(最终反应体积 20 微升)。将细胞上清液、样本或标准品直接加样至检测板中,随后使用均相时间分辨荧光(HTRF)试剂进行人源前胶原检测。标记 HTRF 荧光团的抗体可预先混合,通过单次加样完成添加,进一步简化检测流程。只需按比例调整各试剂的添加体积,该检测即可在 96 孔板至 384 孔板中进行。(图示:assay-protocol-human-pro-collagen-type-1-63adk014peg,人源 1 型前胶原检测方案相关图示)