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铁蛋白(Frataxin)是一种定位于线粒体中的蛋白质,兼具铁分子伴侣和铁储存蛋白的功能。铁蛋白 mRNA 在代谢率较高的组织中大量表达,如肝脏、肾脏、脂肪组织和心脏。铁蛋白表达水平降低是弗里德赖希共济失调(FRDA,Friedreich's Ataxia)的致病原因,这是一种致命性神经退行性疾病。人源铁蛋白检测试剂盒可快速监测细胞产生的铁蛋白。
人源铁蛋白的检测采用双抗夹心免疫分析法,该方法使用两种特异性抗铁蛋白抗体,一种标记有铕 - 穴状化合物(供体,Europium Cryptate),另一种标记有 d2(受体)。检测信号的强度与样本中人源铁蛋白的浓度呈正比。(图示:biomarkers-how-it-1.svg,铁蛋白检测原理相关图示)
人源铁蛋白检测采用双板实验方案:细胞在同一培养板中完成接种、刺激与裂解操作,随后将裂解液转移至检测板中进行人源铁蛋白检测。该方案可对细胞活力与融合度进行监测。标记有均相时间分辨荧光(HTRF)荧光团的抗体可预先混合,通过单次加样完成添加,进一步简化检测流程。只需按比例调整各试剂的添加体积,该检测即可在 96 孔板至 384 孔板中开展。(图示:biomarkers-how-it-2.svg,铁蛋白检测方案相关图示)