产品概述

TIMP1（又称组织金属蛋白酶抑制剂 1，Tissue Inhibitor of Metallo Proteinases 1）是 TIMP 家族中的内源性细胞外基质金属蛋白酶（MMPs）抑制剂，该家族已知有四种亚型（TIMP1 至 TIMP4）。TIMP1 在细胞外基质（ECM）组成中发挥关键作用，是细胞外基质降解的核心调节剂。它通过与 MMPs（如 MMP-2 和 MMP-9）形成 1:1 复合物，不可逆地使其失活，从而调控 MMPs 的活性。在培养上清液和生物体液中，TIMP1 以游离形式（未结合态）或稳定的 TIMP1-MMP 复合物形式存在。TIMP 家族维持着基质降解与合成的平衡，而 MMPs/TIMPs 失衡会导致细胞外基质过度沉积，进而引发纤维化过程。

工作原理

检测原理

人源 TIMP1 的检测采用双抗夹心免疫分析技术，使用两种特异性抗人 TIMP1 抗体，分别标记 HTRF 供体染料和受体染料。信号强度与样本中 TIMP1 的浓度直接成正比。（图示：Assay principle timp，TIMP1 检测原理相关图示）

检测方案

检测采用 384 孔小体积白色板或低体积 96 孔板（最终反应体积 20 µL），操作流程如下：向检测板中直接加入 16 µL 细胞上清液、样本或标准品，随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体可预先混合，通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。通过按比例调整各试剂的添加体积，检测可在 96 孔至 384 孔板中进行。唾液中 TIMP1 含量较高，因此必须采取必要的个人防护装备（PPE）预防污染（如佩戴口罩和手套）。（图示：Assay protocol timp1，TIMP1 检测方案相关图示）

分析性能

• 样本量：16 µL
• 最终检测体积：20 µL
• 出结果时间：室温过夜（ON at RT）
• 试剂盒组分：冷冻标准品、冷冻检测抗体、缓冲液、实验方案
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）：0.15 ng/mL 与 0.63 ng/mL
• 检测范围：0.8–50 ng/mL
• 靶标物种：仅人源（Human only）
• 特异性：与人源 TIMP2 和 TIMP3 无交叉反应

精密度

批内精密度（n=24）

• 样本 1：TIMP1 均值 1.09 ng/mL，变异系数（CV）5.5%
• 样本 2：TIMP1 均值 5.90 ng/mL，变异系数（CV）1.9%
• 样本 3：TIMP1 均值 20.5 ng/mL，变异系数（CV）2.1%
• 平均 CV：3.7%注：每个样本检测 24 次，计算各样本的变异系数（% CV）。

批间精密度（n=4）

• 样本 1：TIMP1 含量 0.89 ng/mL，delta 比值均值 114，变异系数（CV）12%
• 样本 2：TIMP1 含量 6.6 ng/mL，delta 比值均值 1102，变异系数（CV）5%
• 样本 3：TIMP1 含量 26.9 ng/mL，delta 比值均值 4666，变异系数（CV）3%
• 平均 CV：6%注：每个样本在 4 个独立实验中检测，计算各样本的变异系数（% CV）。

检测验证

两种人类细胞系中 TIMP1 的表达

将 IMR90 细胞（人胎儿肺成肌纤维细胞，1.6×10⁶个细胞）和 LX2 细胞 *（人肝星状细胞，2.7×10⁶个细胞）分别接种到 T75 培养瓶中（每组设两个复孔），使用含 10% 胎牛血清（FCS）的 DMEM 培养基培养。3 天后更换为含 0.2% 牛血清白蛋白（BSA）的 DMEM 培养基，细胞分为未刺激组和 TGFβ1（10 ng/mL）刺激组，继续培养 3 天。收集各培养瓶的上清液，用试剂盒中的稀释液按 1:16 稀释后，按照人源 TIMP1 试剂盒方案定量检测 hTIMP1 含量。*LX2 细胞由 EMD Millipore 提供（产品编号 #SCC064）（图示：assay validation human timp，人类细胞系 TIMP1 表达验证相关图示）

HTRF 人源 TIMP1 试剂盒与商业 ELISA 的相关性

对 MRC5、IMR90 和 LX2 细胞 * 的上清液进行平行检测，细胞分为未刺激组和 TGF-β1 处理组（无胎牛血清培养基 + 0.2% BSA，处理 48 小时），分别使用 HTRF 人源 TIMP1 试剂盒和商业 ELISA 试剂盒检测。两种方法的相关性极强，相关系数（r）接近 1。*LX2 细胞由 EMD Millipore 提供（产品编号 #SCC064）（图示：Assay validation human timp，试剂盒与 ELISA 相关性验证相关图示）

产品规格

其他规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF
• 产品类别：Kit
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输
• 靶标类别：Biomarkers（生物标志物）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET
• 治疗领域：NASH/Fibrosis（非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化）、Oncology & Inflammation（肿瘤学与炎症）
• 单位规格：500 assay points