IFN-γ 是一种促炎细胞因子,由 T 细胞和 NK 细胞在病毒感染或炎症条件下分泌。IFN-γ 在固有免疫和适应性免疫中起重要作用,可促进 T 细胞分化为 TH1 细胞和调节性 T 细胞(Treg),并抑制 T 细胞向 TH17 细胞分化。其抗肿瘤特性已用于治疗骨质疏松症,且在免疫肿瘤学领域备受关注,可改善膀胱癌或卵巢癌患者的生存率。
血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测法可能具有足够的灵敏度,能够检测血清或血浆中低水平的分析物。
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板,使用 HTRF® 试剂(384 孔低体积白色板或 Cisbio 低体积 96 孔板,20 µl 体系)进行检测。预先混合标记有 HTRF 供体和受体的抗体,并通过单次加样步骤加入,以进一步简化检测流程。该检测可通过按比例调整各加样体积,直接扩展至 1536 孔板格式。推荐使用四参数逻辑(4PL)曲线拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比,该回归模型可在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,非常适合分析细胞因子释放等生物系统。- 样本体积:16 µL
- 最终检测体积:20 µL
- 试剂盒组分:冻干标准品、冻存检测抗体、缓冲液及实验方案
- 检测限与定量限(在稀释液中):14 pg/mL & 21 pg/mL
- 检测范围:21–4,000 pg/mL
- 出结果时间:室温孵育过夜
- 校准:NIBSC(82/587)值(IU/mL)= 0.019 × HTRF hIFN-γ 值(pg/mL)
- 适用物种:仅限人类
批内检测(n=24)
| 样本 | 平均 [IFN-γ](pg/mL) | 变异系数(CV) |
|---|
| 1 | 209 | 9% |
| 2 | 835 | 11% |
| 3 | 4367 | 7% |
| 平均 CV | 9% |
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每个样本检测 24 次,计算各样本的 % CV。
批间检测(n=4)
| 样本 | [IFN-γ](pg/mL) | 平均(delta R) | 变异系数(CV) |
|---|
| 1 | 98 | 178 | 14% |
| 2 | 432 | 788 | 9% |
| 3 | 1905 | 3170 | 6% |
| 平均 CV | 9.7% |
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每个样本在 4 次不同实验中检测,计算各样本的 % CV。