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HTRF HUMAN IL11 KIT - 10K PTS

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概述

白细胞介素 11（IL11）是白细胞介素 6（IL6）家族细胞因子的成员，可调节炎症反应；并会根据炎症微环境的差异，参与心血管疾病、癌症或肺纤维化的发生发展。

IL11 由多种基质细胞产生，包括成纤维细胞、上皮细胞和成骨细胞，其功能广泛：影响造血过程、抑制脂肪细胞生成、抑制破骨细胞分化、促进组织纤维化、减轻组织损伤，同时还能调节 B 细胞功能。

IL11 分泌后会与其受体结合（该受体由 IL11 受体 α 链与 gp130 共受体组成），进而激活 Jak/STAT 信号通路。

HTRF 人 IL11 检测试剂盒是一种均相 “加样 - 读数” 型检测方法，可用于测定细胞上清液中 IL11 的分泌量，为酶联免疫吸附试验（ELISA）提供了快速高效的替代方案。

工作原理

检测原理

将细胞上清液样本或标准品直接加入检测板中，使用 HTRF® 试剂进行检测（采用 384 孔小体积白色板或 Revvity 小体积 96 孔板，总反应体积为 20 微升）。标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合后，通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。只需按比例调整各步加样体积，该检测即可适配 1536 孔板格式。

（标注：cytokines-how-it-works-assay-principle-human，即 “人类细胞因子检测原理示意图”）

检测数据分析

四参数逻辑（4PL）曲线通常被推荐用于拟合酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线。与线性分析相比，这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测量未知样本，因此非常适合分析细胞因子释放等生物系统。

此外，Revvity 公司还与Myassays.com合作，为你的数据分析提供支持。

检测详情

人 IL11 试剂盒技术规格

技术参数	具体规格
样本量	16 微升
最终检测体积	20 微升
试剂盒组成	冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）	21 皮克 / 毫升和 31 皮克 / 毫升
检测范围	31–5000 皮克 / 毫升
出结果时间	室温（RT）下过夜
校准方式	英国国家生物标准与控制研究所（NIBSC）（92/788）标准值（国际单位 / 毫升）= 0.0093 × HTRF 人 IL11 检测值（皮克 / 毫升）
适用物种	仅人类

分析性能

批内与批间检测

批内检测（n=24，n 为重复检测次数）

样本	IL11 平均值（皮克 / 毫升）	变异系数（CV，%）
1	78	11
2	2500	3.1
3	5000	3
-	平均变异系数	5.7

注：3 个样本各进行 24 次重复检测，并计算每个样本浓度的变异系数（% CV）。

批间检测（n=4，n 为实验批次数量）

样本	IL11 浓度（皮克 / 毫升）	delta R 平均值	变异系数（CV，%）
1	329	1311	9
2	1361	4404	14
3	5516	5516	14
-	-	平均变异系数	12

注：每个样本在 4 个不同实验批次中分别检测，并计算每个样本浓度的变异系数（% CV）；“delta R” 为荧光信号差值，是 HTRF 检测技术的关键信号指标。

加标回收率

样本	重组 IL11 蛋白（皮克 / 毫升）	天然 IL11 蛋白（皮克 / 毫升）	重组蛋白占比（%）	天然蛋白占比（%）	IL11 预期值（皮克 / 毫升）	IL11 检测值（皮克 / 毫升）	回收率
1	2500	675	34	66	1295.5	1467	113%
2	2500	921	50	50	1710.5	1570	92%
3	2500	1819	66	34	2268.5	2073	91%

注：向含有已知浓度 IL11 的 L15 Glutamax+1% 牛血清白蛋白（BSA）细胞上清液样本中，加入不同量的重组 IL11 细胞因子，样本按 1:1 体积比混合。将标准曲线得到的一组响应值与计算出的预期值进行比较，观察到的回收率验证了本检测所用样本基质的适用性。

检测验证

转化生长因子 β（TGFβ）刺激 MDA-MB-231 细胞分泌 IL11

将人 MDA-MB-231 细胞以 40 万个 / 孔的密度接种到 96 孔板中，在含 100 微升完全 L15 Glutamax 细胞培养基、37℃、常压二氧化碳浓度的条件下培养过夜。随后，用在 200 微升 1% BSA L15 Glutamax 培养基中配制的、浓度递增的 TGFβ（0.05–100 微克 / 毫升）刺激细胞。刺激 24 小时后，取 16 微升上清液转移至白色检测板中，通过人 IL11 检测试剂盒进行分析。过夜孵育后记录 HTRF 信号。

（标注：assay-validation-human，即 “人源检测验证示意图”）

规格参数

其他规格参数

规格类别	具体内容
应用（Application）	蛋白质定量（Protein Quantification）
品牌（Brand）	HTRF
检测方式（Detection Modality）	HTRF（均相时间分辨荧光）
产品类别（Product Group）	试剂盒（Kit）
样本体积（Sample Volume）	16 微升
运输条件（Shipping Conditions）	干冰运输（Shipped in Dry Ice）
靶标类别（Target Class）	细胞因子（Cytokines）
靶标物种（Target Species）	人类（Human）
技术（Technology）	TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域（Therapeutic Area）	炎症（Inflammation）、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化（NASH/Fibrosis）
单位规格（Unit Size）	10,000 个检测点（10,000 assay points）

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货号：62HIL11PEH

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