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HTRF (H) IL12/23 P40 KIT - 10K PTS

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品牌： Revvity

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概述

p40 是 p40 家族细胞因子的共有亚基，该家族包含白细胞介素 12（IL-12，p40+p35 异二聚体）、白细胞介素 23（IL-23，p40+p19 异二聚体）、p40 单体及 p80 同源二聚体（p40+p40）。通过检测这一共享亚基，可同时检测上述 4 种细胞因子，它们在炎症反应和免疫调节中起核心作用。

工作原理

? 检测原理

直接将细胞上清液样本或标准品加入检测板，使用 HTRF® 试剂检测（适配 384 孔小体积白色板或 Revvity 96 孔小体积板，终反应体积 20 微升）。
预先混合标记 HTRF 供体和受体的抗体，单次加样即可完成反应，大幅简化流程。
按比例调整各试剂体积，可轻松适配 1536 孔板的高通量检测需求。

（标注：cytokines-how-it-works-assay-protocol，即 “细胞因子检测操作流程示意图”）

? p40 家族检测特性

物种特异性：仅适用于人源样本，对小鼠、大鼠的 p40 家族细胞因子无交叉反应。
检测范围：可与所有含 p40 的分子交叉反应，包括 IL-12、IL-23、p40 单体、p80 二聚体。

（标注：cytokines-how-it-works-assay-principle，即 “细胞因子检测原理示意图”）

? 检测数据分析

推荐使用四参数逻辑（4PL）曲线拟合标准曲线，相比线性分析，能在更宽浓度范围精准测量未知样本，适配细胞因子释放的生物特性。
支持数据深度分析：访问指定页面可了解 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合方法；Revvity 与Myassays.com合作提供免费在线软件，可直接用于 IL12/23 p40 检测数据分析（点击链接即可使用）。

检测详情

? 标准曲线

需使用试剂盒配套的Diluent 5（稀释液 5）制备 IL12/23 p40 标准曲线，确保检测基准统一。

（标注：specification-il12-il23-p40-standard，即 “IL12/23 p40 标准品规格示意图”）

? 核心检测规格

规格项目	具体参数
样本用量	16 微升
最终检测体积	20 微升
试剂盒组成	冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液、说明书
检测限（LOD）- 稀释液中	15 皮克 / 毫升
定量限（LOQ）- 稀释液中	71 皮克 / 毫升
检测限（LOD）- DMEM+10% FCS 中	56 皮克 / 毫升
定量限（LOQ）- DMEM+10% FCS 中	96 皮克 / 毫升
检测限（LOD）- RPMI+10% FCS 中	55 皮克 / 毫升
定量限（LOQ）- RPMI+10% FCS 中	109 皮克 / 毫升
检测范围	71–10000 皮克 / 毫升
出结果时间	室温下过夜
国际标准对应关系	NIBSC（95/544）IL12 值（IU/mL）= 0.01 × HTRF 检测值（pg/mL）
适用物种	仅人类

分析性能

? 批内与批间重复性

批内检测（n=24，同批次重复 24 次）

样本	平均浓度（皮克 / 毫升）	变异系数（CV）
1	218	9.4%
2	4797	7.6%
3	8499	8.3%
-	平均 CV	8.4%
注：样本为经刺激的 THP1 细胞上清液，低 CV 值表明同批次检测稳定性优异。

批间检测（n=3，3 个独立实验 / 3 天）

样本	平均浓度（皮克 / 毫升）	变异系数（CV）
1	191	7.6%
2	4739	1.7%
3	8138	4.6%
-	平均 CV	4.6%
注：跨批次检测 CV 值低，说明试剂盒性能稳定，结果可重复。

? 稀释线性

稀释倍数	预期浓度（皮克 / 毫升）	实测浓度（皮克 / 毫升）	回收率
原液	-	6073.4	100%
2 倍	3036.7	2837.7	91%
4 倍	1518.3	1379.1	91%
8 倍	759.2	610.3	80%
16 倍	379.6	310.7	82%
32 倍	189.8	169.0	89%
-	汇总回收率	-	89%
注：样本为经 DIL5 稀释的 THP1 细胞上清液，平均回收率 89%，表明检测线性良好，高浓度样本稀释后仍可精准测量。

? 抗原加标回收率

样本	加标标准品浓度（皮克 / 毫升）	样本本底浓度（皮克 / 毫升）	预期浓度（皮克 / 毫升）	实测浓度（皮克 / 毫升）	回收率
1	2886	6148	9034	9444	105%
1	2805	5691	-	5885	103%
1	1365	4251	-	4529	107%
2	1410	2732	4142	4353	105%
2	1312	2723	-	2908	107%
2	661	2071	-	2126	103%
3	98	272	370	413	112%
3	111	209	-	259	124%
3	45	143	-	184	129%
-	-	-	-	平均回收率	111%
注：向 THP1 细胞上清液加 3 个梯度重组 p40，平均回收率 111%，说明样本基质对检测无干扰，结果可靠。

? 交叉反应性

检测蛋白	交叉反应性
人 p40 单体	100%
人 p80 二聚体（p40+p40）	65%
人 IL12（p40+p35）	62%
人 IL23（p40+p19）	51%
小鼠 p80 二聚体、IL12、IL23	0%
大鼠 IL12、IL23	0%
注：交叉反应性基于 116–10000 皮克 / 毫升浓度范围的 6 个检测点计算，确保人源特异性检测。

检测验证

? LPS 刺激 THP1 细胞分泌实验

实验设计：THP1 细胞（人单核细胞系）用含 10% FCS 的 RPMI1640 培养基培养，以 20 万 / 孔、40 万 / 孔密度接种 96 孔板，用梯度浓度 LPS（终体积 100 微升）刺激 24 小时。
检测步骤：取 16 微升上清液转移至 384 孔白色检测板，加 4 微升 HTRF 检测试剂，室温过夜孵育后读信号。
关键结论：LPS 浓度越高，IL12/23 p40 分泌量越多；20 万 / 孔细胞密度的检测结果更优，是该悬浮细胞模型的最佳实验条件。

（标注：assay-validation，即 “检测验证示意图”）

产品规格

? 10,000 检测点规格参数

规格类别	具体内容
应用领域	蛋白质定量（Protein Quantification）
品牌	HTRF
检测技术	HTRF（均相时间分辨荧光）、TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
动态范围	71–10000 皮克 / 毫升
检测限（LOD）	15 皮克 / 毫升
定量限（LOQ）	71 皮克 / 毫升
产品类别	试剂盒（Kit）
样本体积	16 微升
运输条件	干冰运输
靶标类别	细胞因子（Cytokines）
靶标物种	人类（Human）
单位规格	10,000 个检测点

没有数据

货号：62HIL12P40PEH

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