概述
白细胞介素 2(IL2)的主要作用是通过对 T 细胞产生影响来调节细胞介导的免疫反应。IL2 可促进 T 细胞分化为效应 T 细胞或记忆 T 细胞,从而帮助机体抵御感染。此外,IL2 在免疫肿瘤学领域也扮演着关键角色,因为它是促进 T 细胞分化为调节性 T 细胞(Treg)的主要物质。血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA(阿尔法酶联免疫吸附试验)的灵敏度足以检测出血清或血浆中低浓度的分析物。进行检测时,务必遵循推荐的实验方案,并避免使用严重溶血的样本。
工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加样到检测板中,随后使用 HTRF® 试剂进行检测(适用检测板类型:384 孔低体积白色板,或 Revvity 品牌低体积 96 孔板,反应体系为 20 微升)。标记有 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合,可通过单次加样步骤加入,进一步简化检测流程。只需按比例调整各试剂的添加体积,该检测方法即可适配至 1536 孔板的检测规格。(图示:1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg)
检测数据分析
四参数逻辑斯蒂(4PL)曲线是酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线拟合的常用方法。与线性分析相比,这种回归方法能在更宽的浓度范围内实现对未知样本的准确定量,因此非常适合细胞因子释放等生物系统的分析场景。若需全面了解 HTRF 数据处理方法及 4PL 1/y² 拟合原理,可参考相关技术资料。此外,Revvity 公司已与Myassays.com合作提供数据分析支持 —— 您可通过一款免费的在线软件进行 IL2 检测数据的分析操作。
检测详情
小鼠 IL2 检测试剂盒技术规格
- 样本量:16 微升(16 µL)
- 最终检测体积:20 微升(20 µL)
- 试剂盒组成:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
- 检测限(LOD)与定量限(LOQ)(在稀释液中):12 皮克 / 毫升(pg/mL)、35 皮克 / 毫升(pg/mL)
- 检测范围:35–2560 皮克 / 毫升(pg/mL)
- 结果获取时间:室温(RT)条件下过夜
- 适用物种:仅小鼠
分析性能
批内与批间检测
批内检测(n=24,即每个样本重复检测 24 次)
- 样本 1:IL2 平均浓度为 100 皮克 / 毫升(pg/mL),变异系数(CV)为 9%
- 样本 2:IL2 平均浓度为 900 皮克 / 毫升(pg/mL),变异系数(CV)为 3%
- 样本 3:IL2 平均浓度为 1800 皮克 / 毫升(pg/mL),变异系数(CV)为 7%
- 平均变异系数(Mean CV):6%
(注:对 3 个样本分别进行 24 次检测,并计算每个样本的变异系数(% CV)。)
批间检测(n=4,即每个样本在 4 个不同实验中检测)
- 样本 1:IL2 浓度为 80 皮克 / 毫升(pg/mL),平均 ΔR 值(delta R)为 329,变异系数(CV)为 2%
- 样本 2:IL2 浓度为 320 皮克 / 毫升(pg/mL),平均 ΔR 值(delta R)为 1461,变异系数(CV)为 3%
- 样本 3:IL2 浓度为 1280 皮克 / 毫升(pg/mL),平均 ΔR 值(delta R)为 5980,变异系数(CV)为 8%
- 平均变异系数(Mean CV):4%
(注:对每个样本在 4 个不同实验中分别检测,并计算每个样本的变异系数(% CV)。)
规格参数
其他规格
- 应用领域(Application):蛋白质定量(Protein Quantification)
- 品牌(Brand):HTRF
- 检测方式(Detection Modality):HTRF(均相时间分辨荧光共振能量转移技术)
- 产品类别(Product Group):试剂盒(Kit)
- 样本体积(Sample Volume):16 微升(16 µL)
- 运输条件(Shipping Conditions):干冰运输(Shipped in Dry Ice)
- 靶标类别(Target Class):细胞因子(Cytokines)
- 靶标物种(Target Species):小鼠(Mouse)
- 技术平台(Technology):TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移技术)
- 治疗领域(Therapeutic Area):神经科学(Neuroscience)、肿瘤学与炎症(Oncology & Inflammation)
- 单位规格(Unit Size):500 个检测点(500 assay points)