概述
白细胞介素 6(IL6)是一种促炎细胞因子,参与急性期反应、炎症过程及癌症进展。它主要由 T 细胞、巨噬细胞和成纤维细胞分泌,能诱导 B 细胞和 T 细胞增殖。目前,IL6 在糖尿病、阿尔茨海默病、抑郁症及多种癌症等广泛研究领域均有涉及。此外,IL6 与转化生长因子 β(TGF beta)共同作为 T 细胞分化为辅助性 T 细胞 17(TH17)的主要促进因子,而 TH17 是免疫肿瘤学领域的新研究方向。血清样本检测通常需要更高灵敏度。部分情况下,AlphaLISA(阿尔法酶联免疫吸附试验)的灵敏度足以检测血清或血浆中低浓度的分析物。检测时需严格遵循推荐实验方案,且避免使用严重溶血的样本。
工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加样到检测板中,再用 HTRF® 试剂检测(适用检测板为 384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板,反应体系 20 微升)。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合,可通过单次加样完成操作,进一步简化检测流程。只需按比例调整各试剂添加体积,该检测还能适配 1536 孔板规格。(图示:1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg)
检测数据分析
酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线拟合常用四参数逻辑斯蒂(4PL)曲线。相比线性分析,这种回归方法能在更宽浓度范围内准确定量未知样本,非常适合细胞因子释放这类生物系统的分析。若需深入了解 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合方法,可参考相关技术资料。此外,Revvity 已与Myassays.com合作提供支持,你可通过免费在线软件完成 IL6 检测数据的分析。
检测详情
小鼠 IL6 检测试剂盒技术规格
- 样本量:16 微升(16 µL)
- 最终检测体积:20 微升(20 µL)
- 试剂盒组成:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
- 稀释液中的检测限(LOD)与定量限(LOQ):分别为 6 皮克 / 毫升(pg/mL)、19 皮克 / 毫升(pg/mL)
- 检测范围:19–7000 皮克 / 毫升(pg/mL)
- 结果获取时间:室温(RT)条件下 1 小时
- 校准关系:NIBSC(93/730)单位值(IU/mL)= 0.7 × HTRF 小鼠 IL6 检测值(pg/mL)
- 适用物种:仅小鼠
分析性能
批内与批间检测
批内检测(n=24,每个样本重复检测 24 次)
- 样本 1:IL6 平均浓度 40 皮克 / 毫升(pg/mL),变异系数(CV)12%
- 样本 2:IL6 平均浓度 1400 皮克 / 毫升(pg/mL),变异系数(CV)7%
- 样本 3:IL6 平均浓度 2800 皮克 / 毫升(pg/mL),变异系数(CV)11%
- 整体平均变异系数(Mean CV):10%
(注:对 3 个样本各进行 24 次检测,并计算每个样本的变异系数(% CV)。)
批间检测(n=4,每个样本在 4 个不同实验中检测)
- 样本 1:IL6 浓度 72 皮克 / 毫升(pg/mL),平均 ΔR 值(delta R)503,变异系数(CV)6%
- 样本 2:IL6 浓度 448 皮克 / 毫升(pg/mL),平均 ΔR 值(delta R)3188,变异系数(CV)10%
- 样本 3:IL6 浓度 2800 皮克 / 毫升(pg/mL),平均 ΔR 值(delta R)18091,变异系数(CV)10%
- 整体平均变异系数(Mean CV):9%
(注:对每个样本在 4 个不同实验中分别检测,并计算每个样本的变异系数(% CV)。)
规格参数
其他规格
- 应用领域(Application):蛋白质定量(Protein Quantification)
- 品牌(Brand):HTRF
- 检测方式(Detection Modality):HTRF(均相时间分辨荧光共振能量转移技术)
- 产品类别(Product Group):试剂盒(Kit)
- 样本体积(Sample Volume):16 微升(16 µL)
- 运输条件(Shipping Conditions):干冰运输(Shipped in Dry Ice)
- 靶标类别(Target Class):细胞因子(Cytokines)
- 靶标物种(Target Species):小鼠(Mouse)
- 技术平台(Technology):TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移技术)
- 治疗领域(Therapeutic Area):代谢 / 糖尿病(Metabolism/Diabetes)、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化(NASH/Fibrosis)、神经科学(Neuroscience)、肿瘤学与炎症(Oncology & Inflammation)
- 单位规格(Unit Size):500 个检测点(500 assay points)