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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Kinases > HTRF KINEASE TK KIT - 20K PTS 激酶测量测试盒-20°C,000测试

  • 作用原理

  • 检测原理

  • 每个 HTRF KinEASE 试剂盒都基于相同的检测形式,并且使用一种通用的生物素化底物、一种磷酸化特异性的铕穴状化合物(Eu-cryptate)标记的单克隆抗体以及链霉亲和素 - XL665(SA-XL665)。酪氨酸激酶(TK)通用底物由一系列重复基序组成,这些基序可被大多数酪氨酸激酶识别,并且在磷酸化后可被特异性偶联抗体识别。


检测方案
如下所示,所有 HTRF KinEASE 检测的操作方式相同,且包含两个步骤:


步骤 1:激酶反应
将激酶在存在或不存在化合物以及合适底物的情况下进行孵育。仅对于酪氨酸激酶,需在激酶缓冲液中添加补充的酶促缓冲液。添加三磷酸腺苷(ATP)以启动反应。


步骤 2:检测
添加铕穴状化合物标记物和 XL665 偶联物。检测缓冲液中含有乙二胺四乙酸(EDTA),用于终止酶促反应。

kinase-how-it-works-assay-principle-htrf-kinease

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