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HTRF STAT3 P-Y705 KIT - 500 PTS 磷酸化STAT3(Y705)检测试剂盒 - 500测试
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这种基于 HTRF 的细胞检测方法能够快速、定量检测 Tyr705 位点磷酸化的 STAT3,以此作为 JAK/STAT 信号通路活性的读数。STAT3 在多种癌症中呈上调状态,使其成为抗癌研究的有力工具。
工作原理
磷酸化 STAT3(Tyr705)检测原理
双板流程包括:先在 96 孔板中培养细胞,裂解后将裂解物转移至 384 孔低体积检测板,再加入磷酸化 STAT3(Tyr705)HTRF 检测试剂。该流程可监测细胞活力和汇合度。
磷酸化 STAT3(Tyr705)单板检测流程
HTRF 与 Western Blot 在磷酸化 STAT3 检测中的对比
IL6 对 NIH 3T3 细胞的剂量反应
HeLa 细胞(100,000 细胞 / 孔)在 37°C 下与不同浓度拮抗剂孵育 1 小时,随后加入激动剂(IFNα)孵育 30 分钟。裂解孵育 30 分钟后,使用 HTRF 磷酸化 STAT3(Tyr705)细胞检测试剂盒的双板流程测量磷酸化 STAT3。
使用 HTRF 总 STAT3 检测验证 STAT3 磷酸化状态
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使用磷酸化 STAT3(Tyr705)和总 STAT3 检测的双板流程,用 IFNα 激活 HeLa 细胞(100,000 细胞 / 孔)15 分钟。结果显示,IFNα 刺激后 STAT3 磷酸化呈剂量依赖性增加,而 STAT3 表达水平保持恒定。
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