本检测旨在测量细胞和组织中 α- 微管蛋白的内源性表达水平，以便对所关注的磷酸化蛋白和 / 或总蛋白的检测数据进行标准化处理。由于 α- 微管蛋白在细胞骨架中发挥着重要作用，它在所有组织中均呈组成型广泛表达。此外，其氨基酸序列高度保守，因此在几乎所有物种中都是相同的。这些特性使其成为最常用的管家蛋白之一。其浓度与细胞数量和总蛋白浓度成正比，因此可作为内部对照用于数据标准化，以校正由实验变异性（例如处理后培养板中剩余的细胞数量或裂解效率）引起的信号变化。仅需 4 µL 的低样本体积，且与所有 HTRF 裂解缓冲液兼容，能够在同一份裂解物中同时检测 α- 微管蛋白以及磷酸化蛋白和 / 或总蛋白，实现多参数分析。

工作原理

α- 微管蛋白管家检测用于测量细胞或组织裂解物中的内源性 α- 微管蛋白。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。α- 微管蛋白管家检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体均对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在 α- 微管蛋白时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，为在免洗涤检测格式中评估由实验变异性引起的任何变化提供了手段。

1phospho-how-it-works-alpha-tubulin-housekeeping-assay-principle.svg（示意图）

该检测采用双板检测方案，即在培养板中接种细胞并进行处理。检测时，将 4 µL 裂解物转移至低体积 96 孔或 384 孔白色板中，加入 12 µL 试剂盒稀释液，然后加入 4 µL HTRF 试剂。该方案能够在合适的细胞培养板中监测细胞活力和汇合度。

2phospho-how-it-works-alpha-tubulin-housekeeping-2-plate-assay-protocol.svg（示意图）

检测验证

α- 微管蛋白简化通路

其他规格

• 应用：蛋白质定量
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF
• 兼容的裂解缓冲液：1 号裂解缓冲液、2 号裂解缓冲液、3 号裂解缓冲液、4 号裂解缓冲液、5 号裂解缓冲液
• 产品类别：试剂盒
• 样品体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输
• 靶标类别：生物标志物
• 技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
• 治疗领域：心血管疾病、感染性疾病、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
• 单位规格：500 个检测点