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HTRF (H/M) CYCLIN D1 TOTAL KIT - 500 PTS 人源鼠源总周期蛋白依赖性激酶D1 HTRF检测试剂盒

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概述

总细胞周期蛋白 D1（Total Cyclin D1）细胞检测试剂盒可便捷、准确地检测细胞内总细胞周期蛋白 D1 的水平。该试剂盒与磷酸化细胞周期蛋白 D1（Thr286）试剂盒的缓冲液兼容，因此同一份裂解物可用于分析磷酸化蛋白和总蛋白群体。

细胞周期蛋白 D 家族成员（包括细胞周期蛋白 D1、细胞周期蛋白 D2 和细胞周期蛋白 D3）是细胞周期进程的重要调控因子。它们作为 CDK4/6 的变构调节因子，是生长因子依赖性 G1 期向 S 期转换的关键介导者。

在细胞外有丝分裂原刺激下，细胞周期蛋白 D1 会被上调，随后在激酶 GSK-3β 的作用下于 Thr286 位点发生磷酸化，并通过蛋白酶体降解迅速下调。

细胞周期蛋白 D1 是一种癌基因，在许多人类癌症中存在过表达。细胞周期蛋白 D1 水平的异常升高会导致 CDK4/6 活性失调，进而引发肿瘤发生。细胞周期蛋白 D1 过表达可能由基因扩增、染色体重排或蛋白质降解受损引起。

工作原理

总细胞周期蛋白 D1 检测原理

总细胞周期蛋白 D1 检测可对细胞裂解物中细胞周期蛋白 D1 的表达水平进行定量。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。总细胞周期蛋白 D1 检测使用两种标记抗体，一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体均对该蛋白质上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在细胞周期蛋白 D1 时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中该蛋白质的浓度直接成正比，并在免洗涤的检测形式下为评估蛋白质的表达水平提供了方法。

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总细胞周期蛋白 D1 双板检测方案

双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至小体积检测板，再加入总细胞周期蛋白 D1 HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。