HTRF RB P-S807/811 KIT - 10K PTS 磷酸化RB(S807/811)试剂盒–10,000测试

[检测验证：Rb 蛋白磷酸化（S807/801）实验 1 图示]

磷酸化 Rb 细胞检测在人和小鼠细胞系上的验证
将 NIH 3T3、C2C12 和 HTC116 细胞以每孔 100,000 个细胞的密度接种于 96 孔板中。在 37°C、5% 二氧化碳的条件下孵育过夜后，弃去细胞培养基，向细胞中加入 50 微升裂解缓冲液。进行裂解步骤，轻柔振荡 30 分钟。将 16 微升样品转移至 384 孔小体积板中，然后加入 4 微升三种 HTRF Rb 检测试剂中的每一种。4 小时后记录信号。

两种 HTRF 磷酸化检测方法均适用于小鼠模型。

[检测验证：Rb 蛋白磷酸化（S807/801）实验 2 图示]

Rb 蛋白具有肿瘤抑制作用，可调节细胞周期进程。

使该蛋白失活的突变会导致视网膜母细胞瘤的发生，在这种情况下，视网膜细胞无法更新，并且会受到高水平的致突变性紫外线辐射。

在没有有丝分裂信号时，活性的低磷酸化 Rb 蛋白会结合并抑制进入 S 期所需的 E2F 转录因子。

通过使 E2F 转录因子失活，Rb 蛋白使细胞维持在 G1 期，阻止细胞周期的进程。

在有丝分裂信号存在时，Rb 蛋白会依次被 cyclin D-CDK4/6 和 cyclin E-CDK2 磷酸化并失活。这一磷酸化事件会促使 E2F 转录因子的释放。

最后，E2F 转录因子会激活诸如细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶、胸苷激酶或增殖细胞核抗原（PCNA）等基因的转录，这些基因在 DNA 合成和复制以及细胞分裂中起着至关重要的作用。

[Rb 蛋白磷酸化（S807/811）通路图示]