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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Prot-prot interac > HTRF STREP-TACTIN-EU - 5K PTS HTRF 铕络合物标记的链霉亲和素突变体,5,000测试

产品概述

Strep-Tactin® 标记铕穴状化合物(Eu cryptate),生物素、Twin Strep-tag® 及 Strep-tag®II 与 Strep-Tactin® 具有高亲和力,结合快速且稳定,是酶分析、蛋白 - 蛋白结合分析、分子生物学分析等多种检测的理想试剂。该试剂对 Strep-tag®II 和 Twin Strep-tag® 融合蛋白的结合经过优化,同时仍可捕获生物素化靶标,适用于检测开发和蛋白相互作用研究。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中,一个结合伴侣标记供体,另一个标记受体,信号强度与两个伴侣的结合程度成正比。示例流程:Strep-Tactin®-Eu 与 Strep-Tag®II 标记的结合伴侣 A 结合,结合伴侣 B 与标记 HTRF 受体的特异性抗体结合。结合伴侣 B 也可进行生物素化、标签标记、Fc 融合修饰,此时需使用相应的 HTRF 试剂标记受体进行检测。(标注:HTRF Strep-Tactin-d2 1b.svg,对应 “Strep-Tactin®-Eu 检测原理示意图”)

检测流程

以 20 微升最终反应体积检测 Strep-Tag®II 标记的结合伴侣 A 与非标记结合伴侣 B 的相互作用为例:加入两种结合伴侣(10 微升),孵育后加入 Strep-Tactin®-Eu 铕穴状化合物(5 微升)和标记受体的抗结合伴侣 B 抗体(5 微升),孵育后读取信号。结合伴侣 B 也可进行标签标记、Fc 融合修饰或直接标记,此时需使用相应的 HTRF 试剂标记受体进行检测。(标注:HTRF Strep-Tactin-d2 2b.svg,对应 “Strep-Tactin®-Eu 检测流程示意图”)

检测详情

试剂供应与活性部分说明

试剂按检测次数销售,单次检测反应体积为 20 微升。每瓶会标注活性部分含量及示踪剂数量,活性部分指偶联物的活性成分(如 Strep-Tactin®)。Strep-Tactin® 本身的生物素结合能力≥50 纳摩尔 / 毫克,纯度≥85%,单个亚基分子量为 13.3 千道尔顿。

检测次数与活性部分的关系

每孔平均偶联物量反映总生物材料含量,优先使用活性部分含量而非总偶联物量。铕穴状化合物和 d2 偶联物的总偶联物量等于活性部分含量,因为标记的分子量可忽略不计。XL665 标记物的总偶联物量因摩尔比不同而异,但 Cisbio 提供的活性部分含量恒定,基于订购的检测次数确定。

推荐使用浓度

铕穴状化合物偶联物浓度需避免过高导致读数仪饱和及背景过高,多数情况下 1-5 纳摩尔浓度适宜,在兼容 HTRF 的读数仪上 620 纳米处可产生 20,000-80,000 计数 / 秒。XL665 偶联物浓度需尽可能与检测对应物匹配,确保最大数量的生物分子被 XL665 受体标记。检测 20 纳摩尔浓度的标记分子时,抗标签 - XL665 浓度应相当或更高。(标注:HTRF Strep-Tactin-d2 3b.svg,对应 “Strep-Tactin®-Eu 检测规格示意图”)

产品规格

  • 应用领域:蛋白 - 蛋白相互作用检测
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF
  • 产品类别:荧光试剂
  • 运输条件:常温运输
  • 靶标类别:结合检测
  • 技术平台:TR-FRET
  • 单位规格:50,000 次检测
  • 核心特性:生物素结合能力≥50 纳摩尔 / 毫克,纯度≥85%


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