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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Prot-prot interac > HTRF STREP-TACTIN-XL665 - 20K PTS

产品概述

Strep-Tactin®(链霉亲和素变体)标记 XL665 荧光基团,生物素、Twin Strep-tag® 及 Strep-tag®II 与 Strep-Tactin® 具有高亲和力,结合快速且稳定。适用于酶分析、蛋白 - 蛋白结合分析、分子生物学分析等多种检测,尤其在蛋白 - 蛋白相互作用检测中可精准捕获目标复合物,为实验提供可靠支撑。

工作原理

检测原理

依托 HTRF 技术的时间分辨荧光共振能量转移机制,检测体系中两个相互作用的目标伴侣需分别标记供体和受体,信号强度与结合程度呈正相关。示例流程:Strep-Tactin®-XL665 特异性结合 Strep-Tag®II 标记的结合伴侣 A,结合伴侣 B 与标记 HTRF 供体的特异性抗体结合。结合伴侣 B 若经过生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰,可替换为抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 试剂标记供体完成检测。(标注:HTRF Strep-Tactin-XL665 1.svg,对应 “Strep-Tactin®-XL665 检测原理示意图”)

检测流程

以 20 微升最终反应体积检测 Strep-Tag®II 标记的结合伴侣 A 与非标记结合伴侣 B 的相互作用:加入两种结合伴侣混合液(10 微升),孵育后加入 Strep-Tactin®-XL665(5 微升)和标记供体的抗结合伴侣 B 抗体(5 微升),再次孵育后读取荧光信号。结合伴侣 B 若为标签标记、Fc 融合修饰或直接标记类型,更换对应标记供体的 HTRF 试剂即可适配检测。(标注:HTRF Strep-Tactin-XL665 2.svg,对应 “Strep-Tactin®-XL665 检测流程示意图”)

检测详情

试剂供应与活性部分界定

试剂按检测次数售卖,单次检测标准反应体积为 20 微升。XL665 或 d2 偶联类型试剂按每孔 40 纳克 Strep-Tactin® 供应,每瓶明确标注活性部分含量与示踪剂数量,活性部分特指偶联物中具备核心结合活性的成分(本产品为 Strep-Tactin®)。20,000 次检测规格的试剂,含 Strep-Tactin® 总含量 800 微克(40 纳克 / 孔 ×20,000 孔)。

检测次数与活性部分的关联

每孔偶联物平均量反映生物材料总体含量,实验计量优先参考活性部分含量而非偶联物总含量。铕 / 铽穴状化合物和 d2 类偶联物因标记物分子量可忽略,总含量与活性部分含量相等;XL665 标记偶联物的总含量受偶联物最终摩尔比影响波动,但 Cisbio 提供的试剂活性部分含量恒定,依据订购检测次数精准设定。(标注:HTRF Strep-Tactin-XL665 3.svg,对应 “Strep-Tactin®-XL665 检测规格示意图”)

适配浓度建议

穴状化合物偶联物浓度需严格把控,避免用量过多导致读数仪饱和或背景信号过高。适宜浓度为 1-5 纳摩尔,在兼容 HTRF 的读数仪上,620 纳米波长下可产生 20,000-80,000 计数 / 秒的信号。XL665 偶联物浓度需尽量与检测目标物浓度匹配,确保更多生物分子被 XL665 受体标记;检测 20 纳摩尔浓度的标记分子时,抗标签 - XL665 浓度需达到等摩尔或更高水平。

产品规格

  • 应用领域:蛋白 - 蛋白相互作用检测
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF
  • 产品类别:荧光试剂
  • 运输条件:常温运输
  • 靶标类别:结合检测
  • 技术平台:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
  • 单位规格:20,000 次检测


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