抗 VHH 单克隆抗体标记铕穴状化合物,该抗体可与羊驼及美洲驼来源的天然 VHH、重组纳米抗体发生特异性结合,结合过程快速且稳定,是纳米抗体筛选、滴定等检测场景的理想试剂。
在 HTRF 相互作用检测体系中,两个相互作用的目标伴侣需分别(直接或间接)标记供体与受体,信号强度与两个伴侣的结合程度呈正相关。具体示例流程为:抗 VHH-Eu 与靶向蛋白 A 的纳米抗体结合,而结合伴侣 A 与标记 HTRF 受体的特异性抗体结合。若结合伴侣 A 经过生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰,可使用抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 试剂标记受体完成检测。(标注:HTRF Anti-VHH Antibody 1.svg,对应 “抗 VHH 抗体 - Eu cryptate 检测原理示意图”)
以 20 微升最终反应体积,检测靶向蛋白 A 的纳米抗体与非标记结合伴侣 A 的相互作用为例,具体步骤如下:先加入两种结合伴侣混合液(10 微升,即蛋白 A + 纳米抗体),随后加入抗 VHH-Eu 铕穴状化合物(5 微升)和标记受体的抗结合伴侣 A 抗体(5 微升),完成孵育后读取荧光信号。若结合伴侣 A 为生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰类型,更换对应标记受体的 HTRF 试剂即可开展检测。(标注:HTRF Anti-VHH Antibody 2.svg,对应 “抗 VHH 抗体 - Eu cryptate 检测流程示意图”)