抗 VHH 单克隆抗体标记铕穴状化合物,该抗体可特异性结合羊驼及美洲驼来源的天然 VHH、重组纳米抗体,结合过程快速且稳定,是纳米抗体筛选、滴定等检测场景的理想试剂。
在 HTRF 相互作用检测体系中,两个相互作用的目标伴侣需分别通过直接或间接的方式标记供体与受体,信号强度与两个伴侣的结合程度呈正相关。具体示例流程为:抗 VHH-Eu 与靶向蛋白 A 的纳米抗体相结合,结合伴侣 A 则与标记 HTRF 受体的特异性抗体相结合。若结合伴侣 A 经过生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰,可选用抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 试剂标记受体完成检测。(标注:HTRF Anti-VHH Antibody 1.svg,对应 “抗 VHH 抗体 - Eu cryptate 检测原理示意图”)
以 20 微升最终反应体积,检测靶向蛋白 A 的纳米抗体与非标记结合伴侣 A 的相互作用为例,具体操作步骤如下:首先加入 10 微升两种结合伴侣的混合液(即蛋白 A + 纳米抗体),随后加入 5 微升抗 VHH-Eu 铕穴状化合物试剂和 5 微升标记受体的抗结合伴侣 A 抗体,完成孵育后读取荧光信号即可。若结合伴侣 A 为生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰类型,更换对应标记受体的 HTRF 试剂即可开展检测。(标注:HTRF Anti-VHH Antibody 2.svg,对应 “抗 VHH 抗体 - Eu cryptate 检测流程示意图”)