HTRF STREPTAVIDIN-XLENT! - 20K PTS

产品概述

链霉亲和素标记 XL665 荧光基团，该试剂经由专属的内部偶联工艺制备而成，形成的高等级偶联物具备增强型荧光特性，被命名为链霉亲和素 - XLent!（SA-XLent!）。生物素与链霉亲和素的亲和力常数高达 10¹⁵M⁻¹，二者结合快速且稳定，是酶分析、蛋白 - 蛋白结合分析、分子生物学分析等多种检测场景的理想试剂。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系中，两个相互作用的目标伴侣需分别通过直接或间接的方式标记供体与受体，信号强度与两个伴侣的结合程度呈正相关。具体示例流程为：链霉亲和素 - XLent! 特异性结合生物素化的结合伴侣 A，结合伴侣 B 则与标记 HTRF 供体的特异性抗体相结合。若结合伴侣 B 经过标签标记或 Fc 融合修饰，可选用抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 试剂标记供体完成检测。（标注：HTRF Streptavidin-XLent 1.svg，对应 “链霉亲和素 - XLent! 检测原理示意图”）

检测流程

以 20 微升最终反应体积，检测生物素化标记的结合伴侣 A 与非标记结合伴侣 B 的相互作用为例，具体操作步骤如下：首先加入 10 微升两种结合伴侣的混合液，完成孵育后加入 5 微升链霉亲和素 - XLent! 试剂和 5 微升标记供体的抗结合伴侣 B 抗体，再次孵育后读取荧光信号即可。若结合伴侣 B 为标签标记、Fc 融合修饰或直接标记类型，更换对应标记供体的 HTRF 试剂即可适配检测。（标注：HTRF Streptavidin-XLent 2.svg，对应 “链霉亲和素 - XLent! 检测流程示意图”）

检测详情

试剂供应与活性部分说明

试剂按检测次数售卖，单次检测的标准反应体积为 20 微升。XL665 或 d2 偶联类型的试剂，遵循每孔含 20 纳克抗体的标准供应。每瓶试剂均会明确标注活性部分含量与瓶内示踪剂数量，活性部分特指偶联物中具备核心活性的成分（如抗体）。其中 5,000 次检测规格的链霉亲和素 - XLent!，其活性部分含量为 250 微克。

检测次数与活性部分的关联

每孔中偶联物的平均量能反映出体系内生物材料的总体含量，在实验计量时，优先参考活性部分的含量而非偶联物总含量。对于铕穴状化合物和 d2 类偶联物，因标记物分子量极小可忽略不计，偶联物总含量与活性部分含量相等；但 XL665 标记的偶联物不同，其总含量会受 XL665 偶联物最终摩尔比的影响而波动。不过 Cisbio 提供的该试剂，其活性部分含量始终保持恒定，且该含量是依据订购的检测次数精准设定的。

适配浓度建议

搭配使用的铕穴状化合物偶联物浓度需严格把控，避免用量过多造成读数仪饱和，同时防止背景信号过高干扰实验结果。通常情况下，1-5 纳摩尔的铕穴状化合物浓度为适宜范围，该浓度在兼容 HTRF 的读数仪上，620 纳米波长下可产生 20,000-80,000 计数 / 秒的信号。XL665 偶联物浓度需尽量与检测体系中的对应目标物浓度匹配，这样才能让更多生物分子被 XL665 受体标记；比如检测 20 纳摩尔浓度的标记分子时，抗标签 - XL665 的浓度需达到与之等摩尔或更高水平。

检测验证

1. HTRF 酪氨酸激酶检测验证：将 HTRF 试剂（铕穴状化合物 PT66 与链霉亲和素 - XLent!）和另外两家供应商的偶联物，共同用于 HTRF 酪氨酸激酶检测。对比结果显示，链霉亲和素 - XLent! 的综合性能优于竞品。
2. EGFR 酪氨酸激酶检测对比：在 EGFR 酪氨酸激酶检测中，将链霉亲和素 - XLent! 与链霉亲和素 - XL665 进行性能比对。实验流程为：将不同剂量的 EGFR 与 50 纳摩尔生物素化 polyGAT 共同孵育，20 分钟后加入 EDTA 终止酶促反应，再加入 20 纳克 / 孔的铕标记 PT66，以及 50 纳摩尔的链霉亲和素 - XL665 或链霉亲和素 - XLent!，孵育 20 分钟后检测 HTRF 信号。结果表明，链霉亲和素 - XLent! 不仅检测灵敏度更高，且在产生相同检测信号的前提下，所需酶用量减少 25% 以上。

（标注：HTRF Streptavidin-XLent 4.svg、HTRF Streptavidin-XLent 5.svg，对应相关检测验证数据示意图）

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF
• 产品类别：荧光试剂
• 运输条件：常温运输
• 靶标类别：结合检测
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
• 单位规格：5,000 次检测