HTRF MAB ANTI DNP-XL665 - 5K PTS

产品概述

该产品是针对二硝基苯 - 牛血清白蛋白（DNP-BSA）制备的 IgG1 型单克隆抗体，经 XL665 荧光基团标记后形成抗 DNP-XL665 试剂。它对 DNP - 氨基己酸及其他二硝基苯（DNP）衍生物均表现出高亲和力，可适配生化与细胞两种实验体系，广泛用于研究蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子、受体 / 配体等多种分子间的相互作用。依托 HTRF 技术，该试剂能够检测解离常数范围从皮摩尔到低毫摩尔的各类亲和力相互作用，满足不同强度分子作用的研究需求。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系中，参与相互作用的两个分子伴侣需分别通过直接或间接的方式标记信号供体与受体，检测信号强度与两个伴侣的结合程度呈正相关。具体应用场景中，抗 DNP-XL665 会特异性结合带有 DNP 标记的结合伴侣 A，结合伴侣 B 则与标记了 HTRF 供体的特异性抗体相结合。若结合伴侣 B 经过生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰，可选用抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 供体标记试剂完成检测。（标注：HTRF MAb Anti DNP-XL665 1.svg，对应 “抗 DNP-XL665 检测原理示意图”）

检测流程

以 20 微升最终反应体积，检测 DNP 标记的结合伴侣 A 与非标记结合伴侣 B 的相互作用为例，具体操作步骤如下：首先加入 10 微升两种结合伴侣的混合液并完成孵育；随后加入 5 微升抗 DNP-XL665 试剂和 5 微升标记供体的抗结合伴侣 B 抗体；再次孵育后读取荧光信号即可。若结合伴侣 B 为生物素化、标签标记、Fc 融合修饰或直接标记类型，替换为对应的供体标记 HTRF 试剂即可适配检测。（标注：HTRF MAb Anti DNP-XL665 2.svg，对应 “抗 DNP-XL665 检测流程示意图”）

检测详情

试剂供应与活性部分说明

试剂按检测次数售卖，单次检测的标准反应体积为 20 微升。经 XL665 或 d2 标记的抗体类试剂，遵循每孔含 20 纳克抗体的标准供应。每瓶试剂均会明确标注活性部分含量与瓶内示踪剂数量，活性部分特指偶联物中具备核心结合活性的成分，本产品中即为抗 DNP 单克隆抗体。其中 5,000 次检测规格的抗 DNP-XL665 试剂，其活性部分含量约为 20 微克，该抗体为鼠源 IgG1 亚型，特异性针对 2,4 - 二硝基苯基序。

检测次数与活性部分的关联

每孔中偶联物的平均含量可反映体系内生物材料的总体含量，实验计量时建议优先参考活性部分的含量，而非偶联物总含量。对于铕 / 铽穴状化合物和 d2 类偶联物，由于标记物分子量极小可忽略不计，偶联物总含量与活性部分含量完全一致；而 XL665 标记的偶联物，其总含量会随 XL665 偶联物的最终摩尔比变化而波动。不过该试剂的活性部分含量由 Cisbio 精准设定，始终保持恒定，且含量与订购的检测次数直接挂钩。（标注：HTRF MAb Anti DNP-XL665 3.svg，对应 “活性部分含量与检测次数关联说明图”）

试剂适配浓度建议

1. 穴状化合物偶联物：浓度需严格把控，避免用量过高导致读数仪信号饱和，同时防止背景信号过高干扰实验结果。多数情况下，1-5 纳摩尔的浓度最为适宜，该浓度在兼容 HTRF 的读数仪上，620 纳米波长下可产生 20,000-80,000 计数 / 秒的信号。
2. XL665 偶联物：浓度需尽可能与检测体系中对应的目标物浓度匹配，以保证更多生物分子被 XL665 受体标记。例如，当检测体系中标记分子浓度为 20 纳摩尔时，抗标签 - XL665 的浓度需达到与之等摩尔及以上水平，才能保障检测效果。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用及多种分子间相互作用研究
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF
• 产品类别：荧光试剂
• 运输条件：常温运输
• 靶标类别：结合检测
• 技术平台：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
• 适用治疗领域：心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
• 单位规格：5,000 次检测