HTRF MAB ANTI-6HIS TB GOLD - 20K PTS 新6组氨酸Tb测量试剂-20°C,20000测试

MAb Anti-6HIS-Tb cryptate Gold 是一种单克隆抗体，针对 Tb 标记的多组氨酸标签融合蛋白制备，可识别合成多组氨酸或多组氨酸标签融合蛋白。

该试剂可用于生化和细胞层面的多种相互作用研究，包括：蛋白质 / 蛋白质、蛋白质 / 肽、蛋白质 / DNA、蛋白质 / RNA、蛋白质 / 碳水化合物、蛋白质 / 小分子、受体 / 配体。

HTRF 技术可检测从皮摩尔到低毫摩尔范围的广泛亲和常数。

工作原理

在 HTRF 相互作用检测中，一个结合伙伴直接或间接标记供体，另一个标记受体（同样直接或间接）。信号强度与两个结合伙伴的结合量成正比。例如：MAb Anti-6HIS Tb cryptate Gold 结合 6His 标签的伙伴 A，而伙伴 B * 结合标记 HTRF 受体的特异性抗体。* 伙伴 B 也可生物素化、带标签、Fc 融合，此时需使用相应的 HTRF 试剂（抗标签、抗种属、Protein A、链霉亲和素）标记受体进行检测。

检测流程

检测次数与活性成分的关系

• Cryptate 偶联物用量不可过量，以免导致读数仪饱和和背景过高。多数情况下，1–5nM 的 Cryptate 浓度合适，根据 HTRF 兼容读数仪不同，可在 620nm 处产生 20,000–80,000 cps 信号。
• XL665 偶联物需尽可能与检测对应物匹配，以最大化 XL665 受体标记的生物分子数量。例如，检测浓度为 20nM 的标签分子时，抗标签 - XL665 浓度应等摩尔或更高。

检测验证

根据标签位置不同，不同蛋白质的检测性能可能存在差异。此处平行使用 Revvity 不同的抗 6His 偶联物（Eu、Tb、Eu Gold、Tb Gold）和 Lanthascreen 抗 His 标签抗体（Eu、Tb）。结果表明，根据研究的相互作用不同，可能需要选择不同抗体：某案例中 Eu 抗体表现良好，另一案例中 Tb 效果更佳。在以下每种互作检测中，Revvity Anti6His Gold 偶联物性能均优于 Lanthascreen Anti-6His 标签抗体。