该产品是针对多聚组氨酸标签融合蛋白制备的 IgG2a 型单克隆抗体,经XL665 荧光基团标记后形成抗 6HIS-XL665 试剂。其具备高特异性,可识别人工合成多聚组氨酸或多聚组氨酸标签融合蛋白,适配生化与细胞两种实验体系,广泛用于研究蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子、受体 / 配体等多种分子间的相互作用。依托 HTRF 技术,该试剂能够检测解离常数范围从皮摩尔到低毫摩尔的各类亲和力相互作用,满足不同强度分子作用的研究需求。
在 HTRF 相互作用检测体系中,参与相互作用的两个分子伴侣需分别通过直接或间接的方式标记信号供体与受体,检测信号强度与两个伴侣的结合程度呈正相关。具体应用场景中,抗 6HIS-XL665 会特异性结合带有 6 组氨酸(6 His)标签的分子伴侣 A,分子伴侣 B 则与标记了 HTRF 供体的特异性抗体相结合。若分子伴侣 B 经过生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰,可选用抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的HTRF 供体标记试剂完成检测。(标注:HTRF MAb Anti 6HIS-XL665 1.svg,对应 “抗 6HIS-XL665 检测原理示意图”)
以 20 微升最终反应体积,检测 6 组氨酸标签的分子伴侣 A 与非标记分子伴侣 B 的相互作用为例,具体操作步骤如下:
试剂按检测次数售卖,单次检测的标准反应体积为 20 微升。经 XL665 或 d2 标记的抗体类试剂,遵循每孔含 20 纳克抗体的标准供应。每瓶试剂均会明确标注活性部分含量与瓶内示踪剂数量,活性部分特指偶联物中具备核心结合活性的成分,本产品中即为抗 6HIS 单克隆抗体。
每孔中偶联物的平均含量可反映体系内生物材料的总体含量,实验计量时建议优先参考活性部分的含量,而非偶联物总含量。