HTRF PAB ANTI RABBIT IGG-TB - 1K PTS Tb标记的兔免疫球蛋白测试蛋白- 1,000测试

产品概述

该产品的核心活性成分为从山羊抗兔免疫血清中提取的免疫球蛋白 G（IgG），经免疫纯化工艺提纯后标记铽穴状化合物（Tb cryptate）制成，产品概述中 “PAb Anti Rabbit IgG - Tb” 为简化称呼，完整活性成分是抗兔 IgG - 铽穴状化合物。它能精准检测未标记的兔特异性抗体与靶分子，或是免疫球蛋白融合蛋白之间的结合情况，是适配大规模实验的高性能检测试剂。此试剂兼容性强，既能用于生化实验体系，也能适配细胞实验体系，可广泛助力多种分子相互作用的研究，包括蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子以及受体 / 配体的相互作用研究。借助 HTRF 技术，它可检测的亲和力常数范围覆盖皮摩尔到低毫摩尔级别，能满足大规模药物筛选、批量生物样本分析等多种科研场景的需求。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系里，参与反应的两种分子需分别通过直接或间接的方式标记供体荧光团与受体荧光团，检测产生的信号强度和这两种分子的结合程度呈正相关。该试剂的典型应用场景为：多克隆抗体抗兔 IgG - 铽穴状化合物与带兔 Fc 融合标签的分子 A 特异性结合，分子 B * 则与标记了 HTRF 受体的特异性抗体相结合。若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合等修饰，可选用抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 受体标记试剂来完成检测，适配不同的实验设计。（标注：HTRF PAb Anti Rabbit IgG - Tb cryptate 1.svg 对应 “抗兔 IgG - 铽穴状化合物 HTRF 检测原理示意图”）

检测流程

以下是终反应体积为 20µL 的标准检测流程，专门用于检测带兔 Fc 融合标签的分子 A 与非标记分子 B * 之间的相互作用，具体步骤如下：

1. 向检测板内加入两种待检测相互作用的分子，总体积 10µL，按照实验设定的条件完成孵育；
2. 接着加入 5µL 多克隆抗体抗兔 IgG - 铽穴状化合物和 5µL 受体标记的抗分子 B 抗体，待孵育步骤结束后，使用 HTRF 兼容检测仪读取信号，即可完成检测。

若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合修饰，或是进行了直接标记，可替换为对应的 HTRF 受体标记试剂开展检测，保障实验的准确性与适配性。（标注：HTRF PAb Anti Rabbit IgG - Tb cryptate 2.svg 对应 “抗兔 IgG - 铽穴状化合物 HTRF 检测流程示意图”）

检测详情

检测次数与活性成分的关联

每孔偶联物的平均用量体现了实验中生物材料的总体含量，相较于参考总偶联物质量，依据活性成分的量来设计实验更为科学可靠。对于铽穴状化合物和 d2 标记的偶联物，由于标记物的分子量极小可忽略不计，其总偶联物量和活性成分量是相等的。而 XL665 标记的偶联物，总偶联物量会随着 XL665 与抗体的最终摩尔偶联比变化而改变。不过 Cisbio 提供的该试剂活性成分量保持恒定，且严格依据订购的检测次数来确定，与 20,000 次检测的规格精准匹配，能有效保障大规模实验结果的稳定性。（标注：HTRF PAb Anti Rabbit IgG - Tb cryptate 3.svg 对应 “检测次数与活性成分关联说明图”）

铽穴状化合物与 XL665 偶联物的推荐用量

1. 铽穴状化合物偶联物：用量需严格把控，过量添加极易造成检测仪信号饱和，还会导致背景信号超标，干扰检测结果。多数实验场景下，1 - 5nM 的铽穴状化合物浓度最为合适，依据所用的 HTRF 兼容检测仪不同，该浓度在 620nm 波长下可产生 20,000 - 80,000cps（计数 / 秒）的稳定信号。
2. XL665 偶联物：其浓度需尽可能与检测靶点浓度匹配，这样才能让最多的生物分子被 XL665 受体标记。比如当检测靶点在实验体系中的浓度为 20nM 时，抗标签 - XL665 偶联物的浓度应达到等摩尔及以上水平，以此保障分子结合效率，提升检测信号的灵敏度与特异性。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：荧光试剂
• 运输条件：干冰运输
• 靶标类别：生物制品
• 靶标物种：兔
• 技术平台：TR - FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 适用治疗领域：涵盖心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤学与炎症、罕见病等多个领域
• 单位规格：20,000 次检测