HTRF IP-One 检测可监测肌醇单磷酸(IP1)的积累,IP1 是磷脂酶 C(PLC)级联激活诱导产生的 IP3 稳定下游代谢物。该试剂盒可直接表征作用于贴壁或悬浮细胞中 Gq 偶联受体的所有类型化合物。
从高通量筛选(HTS)到构效关系(SAR)研究,IP-One 已被证明比传统检测方法具有显著优势。
该试剂盒基于竞争性检测模式,涉及用隐花青(供体)标记的特异性抗体和与 d2(受体)偶联的 IP1。细胞产生的内源性 IP1 与 d2 标记的 IP1 竞争结合单克隆抗 IP1 Tb²⁺隐花青。向细胞刺激缓冲液中加入 LiCl,可使受体激活后 IP1 积累。