总 β- 抑制蛋白 1 细胞检测可监测总 β- 抑制蛋白 1，用于检测多种细胞中内源性或过表达的 β- 抑制蛋白 1 的表达。β- 抑制蛋白 1 属于 β- 抑制蛋白家族，已知参与 G 蛋白偶联受体介导的脱敏作用。它们还能特异性减弱细胞对激素、神经递质或感觉信号等刺激的反应。由于 β- 抑制蛋白 1 在多种组织中表达，人们认为它可能通过影响受体介导的信号传导，在多种癌症或其他人类疾病（如糖尿病）中发挥重要作用。
总 β- 抑制蛋白 1 检测可对细胞裂解物中 β- 抑制蛋白 1 的表达水平进行定量。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。总 β- 抑制蛋白 1 检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在 β- 抑制蛋白 1 时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，且该检测采用无需洗涤的格式，为评估蛋白质表达提供了便利。
双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，然后裂解细胞，接着将裂解物转移到 384 孔小体积检测板中，之后再加入总 β- 抑制蛋白 1 HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。
HTRF 总 BRD2 检测的双板方案
使用 HTRF 试剂检测总 β- 抑制蛋白 1 可在单个板中完成，该板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选设计的方案能够实现小型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。
HTRF 总 BRD2 检测的单板方案
将 HepG2 细胞在含完全培养基的 T175 培养瓶中培养，置于 37°C、5% CO₂条件下。孵育 72 小时后，加入 3 mL 4 号裂解缓冲液（1X），在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟。
使用裂解缓冲液对细胞裂解物进行系列稀释，将 13 µL 各稀释液转移到小体积白色微孔板中，然后加入 3 µL 裂解缓冲液和 4 µL HTRF 总 β- 抑制蛋白 1 检测试剂。取等量的裂解物进行蛋白质印迹法和 HTRF 检测的平行比较。
蛋白质印迹法和 HTRF 检测的平行比较表明，至少在这些实验条件下，HTRF 检测的灵敏度是蛋白质印迹法的 16 倍。
将人（HepG2）、仓鼠（CHO-K1）和小鼠（NIH 3T3）细胞以 100,000 个细胞 / 孔的密度接种在 96 孔板的细胞培养基中，在 37°C、5% CO₂条件下孵育 24 小时。然后移除培养基，加入 50 µL 裂解缓冲液，在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟。将 16 µL 裂解物转移到 384 孔小体积白色微孔板中，并加入 4 µL HTRF 总 β- 抑制蛋白 1 检测试剂。在室温下孵育 3 小时后，记录 HTRF 信号。
