白细胞介素 5(IL5)主要由经白细胞介素 4(IL4)激活后的辅助性 T 细胞 2(TH2 细胞)产生,嗜酸性粒细胞和肥大细胞也可分泌 IL5。IL5 能促进 B 细胞增殖并刺激免疫球蛋白分泌,同时还可诱导嗜酸性粒细胞的激活、增殖与分化。
血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,使用 HTRF® 试剂进行检测(采用 384 孔小体积白色板或 Revvity 小体积 96 孔板,总反应体积为 20 µl)。标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合后,通过单次加样步骤加入,以进一步简化检测流程。只需按比例调整各步加样体积,该检测即可适用于 1536 孔板格式。
(示意图标注:cytokines-how-it-works-assay-principle-human,即 “人类白细胞介素 5 检测原理示意图”)
四参数逻辑(4PL)曲线通常被推荐用于拟合酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线。与线性分析相比,这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,因此非常适合分析细胞因子释放等生物系统。
注:3 个样本各进行 24 次重复检测,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
注:每个样本在 4 个不同实验批次中分别检测,并计算每个样本的变异系数(% CV);“delta R” 为荧光信号差值,是 HTRF 检测技术中的关键信号指标。