HTRF AKT1 P-S473 KIT - 500 PTS 磷酸化AKT1（S473)检测试剂盒-500测试

概述

规格

其他规格

• 应用领域：细胞信号传导
• 品牌：HTRF
• 检测方式：均相时间分辨荧光（HTRF）
• 裂解缓冲液兼容性：裂解缓冲液 1
• 分子修饰类型：磷酸化
• 产品类别：试剂盒
• 样本体积：16 微升
• 运输条件：干冰运输
• 作用靶点类别：磷酸化蛋白
• 作用靶点物种：人类
• 技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
• 治疗领域：代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）/ 纤维化
• 单位规格：500 次检测点

工作原理

磷酸化 AKT1（丝氨酸 473 位点）检测原理

磷酸化 AKT1（丝氨酸 473 位点）双板检测方案

双板检测方案包括先在 96 孔板中培养细胞，细胞裂解后，将裂解物转移到 384 孔低体积检测板中，然后再加入磷酸化 AKT1（丝氨酸 473 位点）HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

磷酸化 AKT1（丝氨酸 473 位点）单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测磷酸化 AKT1（丝氨酸 473 位点）可以在用于细胞培养、刺激和裂解的单个微孔板中进行。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案在实现小型化的同时，仍能保持可靠的 HTRF 检测质量。

检测验证

磷酸化 AKT1 检测：阻断肽的抑制作用

用人类胰岛素样生长因子 - 1（IGF-1）刺激 SH-SY5Y 细胞 15 分钟。刺激后，去除培养基，在室温下轻柔摇晃，用 1 倍稀释的裂解缓冲液裂解细胞 30 分钟。将 14 微升裂解物转移到 384 孔低体积白色微孔板中，在加入 4 微升 HTRF 磷酸化 AKT1（丝氨酸 473 位点）检测试剂之前，先加入 2 微升不同浓度的 AKT1 特异性阻断肽。在室温下孵育过夜后记录 HTRF 信号。

简化的信号通路