概述
磷酸化NDRG1(Ser330)细胞检测试剂盒是测量Ser330位点磷酸化NDRG1的理想选择,也是癌症研究的有力工具。在常与恶性肿瘤进展相关的缺氧条件下,NDRG1会被HIF1 - α上调。NDRG1是一种转移抑制因子,通过阻断血管生成信号通路发挥作用。工作原理
磷酸化NDRG1(Ser330)检测原理 磷酸化NDRG1(Ser330)检测可测量Ser330位点磷酸化的NDRG1。与蛋白质印迹法不同,该检测完全基于平板进行,无需凝胶、电泳或转膜步骤。磷酸化NDRG1(Ser330)检测使用两种标记抗体:一种带有供体荧光团,另一种带有受体荧光团。第一种抗体经选择可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序,第二种抗体则能够不依赖蛋白质的磷酸化状态对其进行识别。蛋白质磷酸化会促使形成涉及两种标记抗体的免疫复合物,使供体荧光团与受体荧光团接近,从而产生荧光共振能量转移(FRET)信号。该信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比,并且提供了一种在无需洗涤的检测形式下评估蛋白质磷酸化状态的方法。 磷酸化NDRG1(Ser330)双板检测方案 双板方案包括先在96孔板中培养细胞,然后裂解细胞,接着将裂解物转移到384孔小体积检测板中,之后再加入磷酸化NDRG1(Ser330)均相时间分辨荧光(HTRF)检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。 HTRF总BRD2检测的双板方案 磷酸化NDRG1(Ser330)单板检测方案 使用HTRF试剂检测磷酸化NDRG1(Ser330)可在单个平板中进行,该平板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选(HTS)设计的方案能够实现小型化,同时保持稳定的HTRF质量。 HTRF总BRD2检测的单板方案检测验证
在HeLa细胞上检测磷酸化NDRG1(Ser330) 将不同细胞密度(10万、5万、2.5万和1.25万)的HeLa细胞以50μL的量接种到96孔板中,在含有40μM Dp44mT的条件下孵育24小时。然后,吸去培养基,用50μL 1X裂解缓冲液在室温下轻轻振荡裂解细胞30分钟。将16μL裂解物转移到384孔白色小体积微孔板中,并加入4μL HTRF磷酸化NDRG1(Ser330)检测试剂。在室温下孵育过夜后记录HTRF信号。规格
其他规格 应用领域 细胞信号传导 品牌 HTRF 检测方式 HTRF 分子修饰 磷酸化 产品类别 试剂盒 样品体积 16μL 运输条件 干冰运输 目标类别 磷酸化蛋白质 技术 时间分辨荧光共振能量转移(TR - FRET) 治疗领域 肿瘤学与炎症 单位规格 50,000个检测点