HTRF (H) ADAR1 TOTAL KIT - 50K PTS

概述

ADAR1 是由两个 ADAR 基因编码的酶之一。它结合双链 RNA（dsRNA），并将其中的腺苷脱氨基转化为肌苷（次黄嘌呤）。ADAR 蛋白在转录后发挥作用，改变 RNA 的核苷酸组成。它们所催化的脱氨基作用会干扰正常的 A:U 配对，使 RNA 不稳定。 ADAR1 和 ADAR2 的调控失衡与多种癌症的发生和发展相关，如胶质母细胞瘤、黑色素瘤或急性白血病。除了在肿瘤发生中的作用，ADAR 酶还被怀疑会加重某些感染性疾病（如艾滋病和麻疹），以及一些精神疾病（如抑郁症、癫痫和精神分裂症）。工作原理

总 ATG16L1 检测原理 HTRF 总 ATG16L1 检测可定量细胞裂解物中 ATG16L1 的表达水平。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。总 ATG16L1 检测使用两种标记抗体，一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的不同表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在 ATG16L1 时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团接近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，并且提供了一种在无需洗涤的检测格式中评估蛋白质表达的方法。 总 ATG16L1 双板检测方案 双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，然后裂解细胞，再将裂解物转移到 384 孔小体积检测板中，之后添加总 ATG16L1 HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。 总 ATG16L1 单板检测方案 使用 HTRF 试剂检测总 ATG16L1 可在单个板中完成，该板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现小型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。检测验证

siRNA 处理的 HepG2 细胞中总 ADAR1 检测的验证 将 HepG2 细胞以不同的细胞密度接种在 96 孔板中，每孔加入 80µl 完全培养基，在 37°C、5% CO₂ 条件下过夜培养。培养后，通过添加 20µl Lipofectamine® RNAiMax/ADAR1 特异性 siRNA 混合物处理细胞，然后在 37°C、5% CO₂ 条件下孵育 24 小时和 48 小时。对于未处理的细胞，加入 20µl OptMEM 培养基代替 siRNA 混合物。孵育后，用 50µl 补充的 1X 裂解缓冲液 #1 在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟，将 16µl 裂解物转移到小体积白色微孔板中，然后加入 2µl HTRF d2 检测试剂和 2µl HTRF Eu-K 检测试剂。过夜孵育后记录 HTRF 信号。规格

其他规格 应用领域：细胞信号传导 品牌：HTRF 检测方式：HTRF 裂解缓冲液兼容性： - 裂解缓冲液 1 - 裂解缓冲液 2 - 裂解缓冲液 3 分子修饰：总蛋白 产品类别：试剂盒 样品体积：16 µL 运输条件：干冰运输 目标类别：磷酸蛋白 目标物种：人 技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET） 单位规格：500 个检测点