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HTRF ERK P-T202/Y204 KIT - 50K PTS

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概述

磷酸化 ERK 检测试剂盒旨在对苏氨酸 202 / 酪氨酸 204（Thr202/Tyr204）位点磷酸化的 ERK 调控进行稳健定量，可作为 MAPK 通路的读数指标，用于 G 蛋白偶联受体（GPCR）和受体酪氨酸激酶（RTK）的靶向筛选。其简单的混合即读 protocol 省去了所有洗涤步骤，能实现更快速的分析并获得高质量结果。

工作原理

磷酸化 ERK（Thr202/Tyr204）检测原理
磷酸化 ERK（Thr202/Tyr204）检测可测量在 Thr202/Tyr204 位点发生磷酸化的 ERK。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。此检测采用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。第一种抗体特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则能识别该蛋白质，且不受其磷酸化状态影响。蛋白质磷酸化会促使这两种标记抗体形成免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生荧光共振能量转移（FRET）信号。该信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比，且无需洗涤步骤即可完成检测。

磷酸化 ERK 双板检测方案
双板方案的流程为：先在 96 孔板中培养细胞，然后裂解细胞，再将裂解液转移至 384 孔小体积检测板中，最后加入磷酸化 ERK HTRF 检测试剂。通过该方案可以监测细胞的活力和汇合度。

磷酸化 ERK 单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测磷酸化 ERK 时，可在单个培养板中完成细胞培养、刺激和裂解等所有操作，无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现实验微型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

简化通路
MAPK/ERK 细胞信号通路
MAPK/ERK 信号级联可被多种参与生长和分化的受体激活。核心信号转导级联调控着众多细胞过程，包括黏附、迁移、凋亡、分化和代谢。MEK1/2 催化 ERK1/2 在 Tyr204 和 Thr202 位点发生磷酸化。相应地，ERK 会磷酸化数百种细胞质和细胞核底物。MAPK 信号通路的高度复杂性和多样性使 ERK 成为生物学中重要的调控因子和主要信号节点。

检测验证

规格参数

其他规格
应用领域：细胞信号传导
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
分子修饰：磷酸化
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：常温运输
检测靶点：ERK1/2
靶点类别：磷酸化蛋白质
目标物种：人、小鼠
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
单位规格：50,000 个检测点

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货号：64ERKPEY

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