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HTRF (H) P21 KIT - 500 PTS 人细胞周期抑制蛋白p21检测试剂盒 - 500测试

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概述

p21，也被称为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1 或 CDK 相互作用蛋白 1，是一种关键的细胞周期蛋白 - CDK 复合物抑制剂，它能与细胞周期蛋白 - CK2、细胞周期蛋白 - CDK1 以及细胞周期蛋白 - CDK4/6 结合，并调节它们的活性。p21 与 p53 协同作用，在 DNA 损伤后实现下游细胞周期停滞，且其表达受泛素连接酶驱动的蛋白质降解过程负调控。

工作原理

HTRF 人源 p21 检测原理

HTRF 人源 p21 检测用于定量测定细胞裂解物中人源 p21 的表达水平。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。此检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。当细胞裂解物中存在 p21 时，加入这些偶联抗体后，供体荧光团与受体荧光团会靠近并产生荧光共振能量转移（FRET）信号。该信号强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，且能在无需洗涤的检测形式下评估蛋白质的表达水平。

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HTRF 人源 p21 双板检测方案

双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至 384 孔小体积检测板，再加入人源 p21 HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

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检测验证

Tenovin - 1 刺激的 MCF - 7 细胞中 p21 的激活实验

将 MCF - 7 细胞以每孔 50,000 个细胞的密度接种到 96 孔板中，每孔加入 100 µL 完全培养基，在 37°C、5% CO₂条件下过夜孵育。孵育后，用 p53 激活剂 Tenovin - 1 以剂量梯度方式处理细胞，并在 37°C、5% CO₂条件下孵育 24 小时。

孵育结束后，移除培养基，加入 50 µL 补充的 1X 裂解缓冲液 #2，在室温下轻轻摇晃裂解细胞 30 分钟。

将 16 µL 裂解物转移至小体积白色微孔板中，然后加入 2 µL HTRF d2 检测试剂和 2 µL HTRF Eu - K 检测试剂。孵育 4 小时后记录 HTRF 信号。

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规格

其他规格
应用：细胞信号传导
自动化兼容性：是
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
兼容的裂解缓冲液：1 号裂解缓冲液、2 号裂解缓冲液
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR - FRET）
治疗领域：肿瘤学与炎症
单位规格：500 个检测点

没有数据

货号：64HP21PEG

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