64HPRTPEY

概述

HTRF 人孕酮受体检测试剂盒可监测多种细胞中内源性或过表达孕酮受体的表达情况。该试剂盒可识别 PRA 和 PRB 亚型。

孕酮受体（PR）是一种由孕酮激活的核受体。孕酮穿过细胞膜并与该受体结合。结合后，PR 发生同源二聚化，从而能够转运至细胞核内。在辅激活因子的作用下，受体二聚体会被募集到孕酮反应元件（PRE）上，并诱导基因表达，进而维持细胞增殖与凋亡的平衡。PR 的表达受雌激素受体调控。因此，PR 是一种常用的生物标志物，可作为雌激素受体 -α 功能的指示物。有研究表明，MAPK 激酶通路也可通过磷酸化作用影响 PR 的活性。

原理
人总孕酮受体检测试剂盒的检测原理
HTRF 人孕酮受体检测试剂盒可对细胞裂解物中孕酮受体的表达水平进行定量分析。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测完全在微孔板上进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。人孕酮受体检测采用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在孕酮受体时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中蛋白质的浓度直接相关，且该检测采用无需洗涤的格式，为评估蛋白质表达提供了便利。

人总孕酮受体检测试剂盒
人总孕酮受体检测试剂盒的双板检测方案
双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，然后裂解细胞，再将裂解物转移至 384 孔小体积检测板中，最后加入人孕酮受体 HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

人总孕酮受体检测试剂盒
人总孕酮受体检测试剂盒的单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测人孕酮受体可在单个培养板中完成，该培养板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案在实现微型化的同时，仍能保持稳定的 HTRF 检测质量。

人总孕酮受体检测试剂盒
检测验证
雌激素靶向化合物对雌激素受体和孕酮受体表达的影响
本实验以人乳腺癌细胞系 MCF7 为研究对象。将细胞以每孔 50,000 个的密度接种到 96 孔培养板中，使用完全培养基培养，在 37°C、5% CO₂条件下孵育过夜。然后用他莫昔芬（SERM）、氟维司群（SERD）或 ERD-308（PROTAC）化合物处理细胞 4 小时或 16 小时。处理后，加入 50 µL 补充裂解缓冲液，在室温下轻轻振荡 30 分钟以裂解细胞。检测步骤：将 16 µL 细胞裂解物转移至 384 孔小体积白色微孔板中，加入 4 µL HTRF 人雌激素受体 α 或 HTRF 人孕酮受体检测试剂。孵育过夜后记录 HTRF 信号。

正如预期的那样，他莫昔芬对雌激素受体没有显著影响，但会导致孕酮受体表达降低。氟维司群和 ERD-308 会使雌激素受体 α 和孕酮受体的表达均降低。与对孕酮受体的影响相比，这些化合物对雌激素受体的作用更快，这与文献报道一致。

人总孕酮受体检测试剂盒
MCF7 细胞中雌激素受体化合物处理实验
将人乳腺癌细胞系 MCF7 细胞以每孔 50,000 个的密度接种到 96 孔培养板中，使用完全培养基培养，在 37°C、5% CO₂条件下孵育过夜。用雌二醇（激动剂）、他莫昔芬（SERM）、氟维司群（SERD）或 ERD-308（PROTAC）化合物处理细胞 16 小时。处理后，加入 50 µL 补充裂解缓冲液，在室温下轻轻振荡 30 分钟以裂解细胞。检测步骤：将 16 µL 细胞裂解物转移至 384 孔小体积白色微孔板中，加入 4 µL HTRF 人孕酮受体检测试剂。孵育过夜后记录 HTRF 信号。

正如预期的那样，氟维司群、ERD308 和他莫昔芬会诱导孕酮受体表达呈剂量依赖性降低，而雌二醇则无此作用。

人总孕酮受体检测试剂盒
简化通路
孕酮受体信号通路
孕酮受体（PR）是一种由孕酮激活的核受体。孕酮穿过细胞膜并与该受体结合。结合后，PR 发生同源二聚化，从而能够转运至细胞核内。在辅激活因子的作用下，受体二聚体会被募集到孕酮反应元件（PRE）上，并诱导基因表达，进而维持细胞增殖与凋亡的平衡。

PR 的表达受雌激素受体调控。因此，PR 是一种常用的生物标志物，可作为雌激素受体 -α 功能的指示物。有研究表明，MAPK 激酶通路也可通过磷酸化作用影响 PR 的活性。

人总孕酮受体检测试剂盒

规格

其他规格
应用
细胞信号传导
品牌
HTRF
检测方式
HTRF
兼容的裂解缓冲液
裂解缓冲液 1
裂解缓冲液 2
裂解缓冲液 3
裂解缓冲液 4
分子修饰
总（蛋白）
产品类别
试剂盒
样品体积
16 µL
运输条件
干冰运输
靶标类别
磷蛋白
靶标物种
人
技术
时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
单位规格
500 个检测点

当前位置：首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF (H) PR TOTAL KIT - 50K PTS

HTRF (H) PR TOTAL KIT - 50K PTS