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HTRF HISTONE H3 TOTAL KIT - 10K PTS 总组蛋白 H3试剂盒- 10,000测试

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概述

总组蛋白 H3 细胞检测试剂盒可作为磷酸化组蛋白 H3 试剂盒的归一化检测工具。组蛋白 H3 是基因表达和细胞有丝分裂的关键调控因子，因此成为抗癌研究中的重要工具。

工作原理

总组蛋白 H3 检测原理

总组蛋白 H3 检测可对细胞裂解液中组蛋白 H3 的表达水平进行定量分析。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测完全基于微孔板开展，无需凝胶、电泳或转膜步骤。总组蛋白 H3 检测采用两种标记抗体：一种与供体荧光团偶联，另一种与受体荧光团偶联。两种抗体均对组蛋白 H3 上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在组蛋白 H3 时，加入这些偶联抗体后，供体荧光团与受体荧光团会近距离接触，进而产生荧光共振能量转移（FRET）信号。该信号强度与样品中组蛋白 H3 的浓度呈直接正相关，且可通过 “免洗涤” 检测模式评估该蛋白的表达水平。

（注：“Phospho how it works total histone h3 cellular assay principle” 为重复且表述不完整的标题标识，无额外有效内容，故不单独翻译）

总组蛋白 H3 双板检测方案

双板检测方案的流程为：先在 96 孔板中培养细胞，随后进行裂解；将裂解液转移至 384 孔低体积检测板后，再加入总组蛋白 H3 均相时间分辨荧光（HTRF）检测试剂。该方案可实现对细胞活力和汇合度的监测。

（注：“Phospho how it works total histone h3 2 plate assay protocol” 为重复且表述不完整的标题标识，无额外有效内容，故不单独翻译）

总组蛋白 H3 单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测总组蛋白 H3 时，可在同一块微孔板中完成细胞培养、刺激和裂解操作，无需洗涤步骤。该方案专为高通量筛选（HTS）设计，既能实现实验微型化，又能保持稳定可靠的 HTRF 检测质量。

（注：“Phospho how it works total histone h3 1 plate assay protocol” 为重复且表述不完整的标题标识，无额外有效内容，故不单独翻译）

检测验证

总组蛋白 H3 作为磷酸化组蛋白 H3（丝氨酸 10 位点，Ser10）检测的归一化对照

将 NIH3T3 细胞（每孔 1.25×10⁴个细胞，12.5KC / 孔）接种到 96 孔板中，并用诺考达唑（Nocodazole）处理 —— 诺考达唑是一种抗有丝分裂剂，可使微管解聚并将细胞阻滞在有丝分裂阶段，从而刺激组蛋白 H3（Ser10）的磷酸化。实验分为两组：一组细胞（实验 a）与抑制剂达努塞替（Danusertib）共处理 16 小时，另一组细胞（实验 b）不进行共处理。移除细胞培养基后，加入 200 微升（µL）添加了补充剂的裂解缓冲液，孵育 30 分钟。随后，取每孔 10 微升（µL）的裂解液转移至 384 孔白色检测板（384sv white plate）中，同时进行总组蛋白 H3 检测和磷酸化组蛋白 H3（Ser10）检测，以开展 HTRF 分析。

（注：“Assay validation histone h3 total 1”“Assay validation histone h3 total 2” 为无具体内容的检测验证标识，无额外有效信息，故不单独翻译）

简化通路

总组蛋白 H3 细胞信号通路

组蛋白 H3 是将 DNA 压缩成染色质的 5 种主要经典组蛋白之一。组蛋白的核心球状结构域位于其较长的 N 端尾部，该尾部存在大量翻译后修饰，且决定了染色质是形成高度浓缩的异染色质，还是形成低浓缩的常染色质。乙酰化、甲基化、磷酸化等多种协同作用的修饰类型共同构成 “组蛋白密码”，该密码可被染色质重塑机制识别。因此，组蛋白修饰在基因的动态调控和长期调控中发挥关键作用，能改变周围 DNA 对转录机制的可及性。其中，组蛋白 H3 尾部的丝氨酸 10（Ser10）或苏氨酸 3（Thr3）磷酸化修饰，与基因表达及细胞有丝分裂过程密切相关。

（注：“Phospho pathway total histone h3 64nh3peg” 为通路标识代码，无具体描述内容，故不单独翻译）

规格参数

其他规格

应用领域（Application）：细胞信号传导
品牌（Brand）：HTRF
检测方式（Detection Modality）：HTRF（均相时间分辨荧光）
分子修饰类型（Molecular Modification）：总蛋白（Total）
产品类别（Product Group）：试剂盒（Kit）
样品体积（Sample Volume）：16 微升（µL）
运输条件（Shipping Conditions）：干冰运输
靶标类别（Target Class）：磷酸化蛋白（Phosphoproteins）
靶标物种（Target Species）：人（Human）、小鼠（Mouse）
技术原理（Technology）：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域（Therapeutic Area）：神经科学（Neuroscience）
单位规格（Unit Size）：10,000 个检测点（10,000 assay points）

没有数据

货号：64NH3PEH

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