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HTRF AKT TOTAL KIT - 50K PTS

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概述

Total ATK 试剂盒是一种功能强大、即用型检测工具，旨在监测 AKT 所有 3 种亚型的表达调控情况。AKT 是一种癌基因，可调控细胞凋亡、细胞增殖、转录、细胞迁移和葡萄糖代谢。该试剂盒是我们磷酸化 AKT（Ser473 和 Thr 308）试剂盒的理想配套产品，可用作归一化检测工具。

工作原理
Total-AKT 检测原理
Total-AKT 检测可定量细胞裂解物中 AKT 的表达水平。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。Total-AKT 检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在 AKT 时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团接近，从而产生 FRET 信号。其强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，且无需洗涤步骤即可评估蛋白质的表达。

Total-AKT 双板检测方案
双板方案包括先在 96 孔板中培养细胞，然后进行裂解，再将裂解物转移到 384 孔小体积检测板中，之后加入 Total AKT HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

Total-AKT 单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测总 AKT 可在单个培养、刺激和裂解用板中进行。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现微型化，同时保持稳定的 HTRF 质量。

检测验证
总 AKT 用于控制 AKT（Ser473）的磷酸化状态
采用磷酸化 AKT（Ser473）和总 AKT 检测的双板检测方案，用 IGF-1 激活 HEK293 细胞（100,000 个细胞 / 孔）10 分钟。正如预期的那样，结果显示在 IGF-1 刺激下，AKT 磷酸化呈剂量反应性增加，而 AKT 表达水平保持恒定。

简化通路
AKT 简化通路
AKT（或蛋白激酶 B）在控制细胞存活和凋亡中起关键作用。这种丝氨酸 / 苏氨酸蛋白激酶受胰岛素以及各种生长和存活因子调控，在涉及 PI3 激酶的渥曼青霉素敏感通路中发挥作用。当 AKT 的 Pleckstrin 同源（PH）结构域与磷酸肌醇结合时，AKT 可被两种不同的激酶磷酸化：PDK1 在苏氨酸 308 位磷酸化，mTORC2（雷帕霉素的哺乳动物靶标）在丝氨酸 473 位磷酸化，从而激活 AKT。

规格

其他规格
应用
细胞信号传导
品牌
HTRF
检测方式
HTRF
分子修饰
总蛋白
产品类别
试剂盒
样品体积
16 µL
运输条件
干冰运输
靶标类别
磷酸蛋白
靶标物种
人
技术
时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域
代谢 / 糖尿病
非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化
肿瘤学与炎症
单位规格
50,000 个检测点

没有数据

货号：64NKTPEY

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